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Photodynamic inactivation of four Candida species induced by photogem®

DOVIGO, Lívia Nordi; PAVARINA, Ana Cláudia; RIBEIRO, Daniela Garcia; ADRIANO, Cynthia Sanchez; BAGNATO, Vanderlei Salvador
Fonte: Sociedade Brasileira de Microbiologia Publicador: Sociedade Brasileira de Microbiologia
Tipo: Artigo de Revista Científica
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27.26456%
This study evaluated the in vitro susceptibility of C. albicans, C. dubliniensis, C. tropicalis and C. krusei to photodynamic therapy (PDT) induced by Photogem® and light emitting diode (LED). Suspensions of each Candida strain were treated with three photosensitizer (PS) concentrations (10, 25 and 50 mg/L) and exposed to 18.0, 25.5 and 37.5 J/cm² LED light fluences (λ ~ 455 nm). Control suspensions were treated only with PS concentrations, only exposed to the LED light fluences or not exposed to LED light or PS. Sixteen experimental conditions were obtained and each condition was repeated three times. From each sample, serial dilutions were obtained and aliquots were plated on Sabouraud Dextrose Agar. After incubation of plates (37 ºC for 48 hours), colonies were counted (cfu/mL) and the data were statistically analyzed by ANOVA and the Tukey test (α=0.05). Complete killing of C. albicans was observed after 18.0 J/cm² in association with 50 mg/L of PS. C. dubliniensis were inactivated after 18.0 J/cm² using 25 mg/L of PS. The inactivation of C. tropicalis was observed after photosensitization with 25 mg/L and subsequent illumination at 25.5 J/cm². For C. krusei, none of the associations between PS and light resulted in complete killing of this species. PDT proved to be effective for the inactivation of C. albicans...

Phototransformation of hematoporphyrin in aqueous solution: Anomalous behavior at low oxygen concentration

PRATAVIEIRA, S.; SANTOS, P. L. A.; MENEZES, P. F. C.; KURACHI, Cristina; SIBATA, C. H.; JARVI, M. T.; WILSON, B. C.; BAGNATO, Vanderlei Salvador
Fonte: MAIK NAUKA/INTERPERIODICA/SPRINGER Publicador: MAIK NAUKA/INTERPERIODICA/SPRINGER
Tipo: Artigo de Revista Científica
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27.26456%
The photoactivation of a photosensitizer is the initial step in photodynamic therapy (PDT) where photochemical reactions result in the production of reactive oxygen species and eventually cell death. In addition to oxidizing biomolecules, some of these photochemical reactions lead to photosensitizer degradation at a rate dependent on the oxygen concentration among other factors. We investigated photodegradation of Photogem A (R) (28 mu M), a hematoporphyrin derivative, at different oxygen concentrations (9.4 to 625.0 mu M) in aqueous solution. The degradation was monitored by fluorescence spectroscopy. The degradation rate (M/s) increases as the oxygen concentration increases when the molar ratio of oxygen to PhotogemA (R) is greater than 1. At lower oxygen concentrations (< 25 mu M) an inversion of this behavior was observed. The data do not fit a simple kinetic model of first-order dependence on oxygen concentration. This inversion of the degradation rate at low oxygen concentration has not previously been demonstrated and highlights the relationship between photosensitizer and oxygen concentrations in determining the photobleaching mechanism(s). The findings demonstrate that current models for photobleaching are insufficient to explain completely the effects at low oxygen concentration.; Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP); CEPID; FAPESP; Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP); Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES); CAPES; Canadian Cancer Society/NCIC; Canadian Cancer Society/NCIC

A combination of techniques to evaluate photodynamic efficiency of photosensitizers

CAVALCANTE, R. S.; IMASATO, H.; Bagnato, Vanderlei Salvador; PERUSSI, J. R.
Fonte: WILEY-V C H VERLAG GMBH Publicador: WILEY-V C H VERLAG GMBH
Tipo: Artigo de Revista Científica
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27.26456%
Photodynamic therapy, used mainly for cancer treatment and microorganisms inaction, is based on production of reactive oxygen species by light irradiation of a sensitizer. Hematoporphyrin derivatives as Photofrin (R) (PF) Photogem (R) (PG) and Photosan (R) (PF), and chlorin-c6-derivatives as Photodithazine (R)(PZ), have suitable sensitizing properties. The present study provides a way to make a fast previous evaluation of photosensitizers efficacy by a combination of techniques: a) use of brovine serum albumin and uric acid as chemical dosimeters; b) photo-hemolysis of red blood cells used as a cell membrane interaction model, and c) octanol/phosphate buffer partition to assess the relative lipophilicity of the compounds. The results suggest the photodynamic efficient rankings PZ > PG >= PF > PS. These results agree with the cytotoxicity of the photosensitizers as well as to chromatographic separation of the HpDs, both performed in our group, showing that the more lipophilic is the dye, the more acute is the damage to the RBC membrane and the oxidation of indol, which is immersed in the hydrophobic region of albumin.; Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP); FAPESP; Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES); CAPES

Analysis of the combined effect of lasers of different wavelengths for PDT outcome using 600, 630, and 660 nm

ATIF, M.; FAKHAR-E-ALAM, M.; SABINO, L. G.; IKRAM, M.; ARAUJO, M. T. de; KURACHI, Cristina; BAGNATO, Vanderlei Salvador; ALSALHI, M. S.
Fonte: WILEY-BLACKWELL Publicador: WILEY-BLACKWELL
Tipo: Artigo de Revista Científica
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27.588066%
We investigated the effects of photodynamic therapy (PDT) outcome when combining three laser systems that produce light in three different wavelengths (600, 630, and 660 nm). Cooperative as well as independent effects can be observed. We compared the results of the combined wavelengths of light with the effect of single laser for the excitation of the photosensitizer. In the current experiment, the used photosensitizer was Photogem (R) (1.5 mg/kg). Combining two wavelengths for PDT, their cumulative dose and different penetrability may change the overall effect of the fluence of light, which can be effective for increasing the depth of necrosis. This evaluation was performed by comparing the depth and specific aspect of necrosis obtained by using single and dual wavelengths for irradiation of healthy liver of male Wistar rats. We used 15 animals and divided them in five groups of three animals. First, Photogem (R) was administered; follow by measurement of the fluorescence spectrum of the liver before PDT to confirm the level of accumulation of photosensitizer in the tissue. After that, an area of 1 cm(2) of the liver was illuminated using different laser combinations. Qualitative analysis of the necrosis was carried out through histological and morphological study. [GRAPHICS] (a) - microscopic images of rat liver cells...

Aggregation susceptibility on phototransformation of hematoporphyrin derivatives

MENEZES, P. F. C.; IMASATO, H.; FERREIRA, J.; BAGNATO, Vanderlei Salvador; SIBATA, C. H.; PERUSSI, J. R.
Fonte: WILEY-V C H VERLAG GMBH Publicador: WILEY-V C H VERLAG GMBH
Tipo: Artigo de Revista Científica
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27.26456%
Photosensitizers used in PDT suffer degradation by light. In this work, photobleaching of Photogem((R)) (PG), Photofrin((R)) (PF), and Photosan((R)) (PS), hematoporphyrin derivatives, were induced by light in the presence or absence of 1% Triton X-100. The degradation efficiency in the absence of 1% Triton X-100 follows the sequence: Pf > PF > Ps, which means that PF presented a greater degradation than PF and PS. Forever, in the presence of the surfactant the degradation efficiency is different: PF congruent to PS > PF. Besides aggregation susceptibility, studies in cell culture (tumor and non tumor cells) and in animals (depth of necrosis) were performed, trying to correlate the stability of these photosensitizers with their photodynamic effect. The results suggest that PF presents higher light induced photo-cytotoxicity than PF and PS for both types of cells. For the depth of necrosis studies, more aggregated photosensitizer showed a longer time to accumulate in liver (30 min for PG, 120 h for PF and 720 h for PS). The, to establish an ideal dosimetry in PDT, one must consider the intrinsic physical chemistry characteristics of the photosensitizer as well as their ability to undergo photobleaching.

Photodynamic therapy associating Photogem (R) and blue LED on L929 and MDPC-23 cell culture

RIBEIRO, Ana Paula Dias; PAVARINA, Ana Claudia; TRINDADE, Flavia Zardo; INADA, Natalia Mayumi; BAGNATO, Vanderlei Salvador; COSTA, Carlos Alberto de Souza
Fonte: ACADEMIC PRESS LTD- ELSEVIER SCIENCE LTD Publicador: ACADEMIC PRESS LTD- ELSEVIER SCIENCE LTD
Tipo: Artigo de Revista Científica
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27.922012%
To evaluate the cytotoxicity of PDT (photodynamic therapy) with Photogem (R) associated to blue LED (light-emitting diode) on L929 and MDPC-23 cell cultures, 30000 cells/cm(2) were seeded in 24-well plates for 48 h, incubated with Photogem (R) (10, 25 or 50 mg/l) and irradiated with an LED source (460 +/- 3 nm; 22 mW/cm(2)) at two energy densities (25.5 or 37.5 J/cm(2)). Cell metabolism was evaluated by the MTT (methyltetrazolium) assay (Dunnet`s post hoc tests) and cell morphology by SEM (scanning electron microscopy). Flow cytometry analysed the type of PDT-induced cell death as well and estimated intracellular production of ROS (reactive oxygen species). There was a statistically significant decrease of mitochondrial activity (90% to 97%) for all Photogem (R) concentrations associated to blue LED, regardless of irradiation time. It was also demonstrated that the mitochondrial activity was not recovered after 12 or 24 h, characterizing irreversible cell damage. PDT-treated cells presented an altered morphology with ill-defined limits. In both cell lines, there was a predominance of necrotic cell death and the presence of Photogem (R) or irradiation increased the intracellular levels of ROS. PDT caused severe toxic effects in normal cell culture...

"Estudos espectroscópicos e citotóxicos do Photogem® fotodegradado e dos fotoprodutos formados pela irradiação com laser"; "Spectroscopics and cytotoxics studies of Photogem® photodegradate and of photoproducts formated by irradiation with laser"

Menezes, Priscila Fernanda Campos de
Fonte: Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP Publicador: Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP
Tipo: Tese de Doutorado Formato: application/pdf
Publicado em 01/09/2006 PT
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38.503186%
A Terapia Fotodinâmica (TFD) é uma técnica para induzir dano ao tecido tumoral e consiste na administração de uma droga fotossensível que pode ser seletivamente retida no tecido tumoral e que produz oxigênio singlete quando irradiada em comprimento de onda adequado na presença de oxigênio molecular. Fotossensibilizadores do tipo porfirinas podem ser degradados pela luz modificando a concentração do fotossensibilizador (FS) no tumor. Este processo chamado de fotodegradação caracteriza-se pela diminuição nas intensidades das bandas de absorbância e fluorescência e pode ser acompanhado pela formação de fotoprodutos. Neste estudo o FS usado foi Photogem®, um derivado de hematoporfirina produzido na Rússia e que está sendo usado em TFD no Brasil. A fotodegradação do sensibilizador e formação de fotoprodutos foi monitorada pelas mudanças nas propriedades de fluorescência e absorbância, assim como pela formação do fotoproduto evidenciado pelo aparecimento de uma nova banda em torno de 640nm em PBS e 660nm em soluções de Triton X-100 e Brij-35. A fotodegradação do Photogem® e a formação dos fotoprodutos foram induzidas pela irradiação com laser e LED em diferentes concentrações, comprimentos de ondas de irradiação (351...

"Correlação entre bioquímica celular e necrose tecidual em regimes de fracionamento de dose de luz em terapia fotodinâmica"; Correlation between cellular biochemistry and tecidual necrosis in light fractionation on photodynamic tehrapy

Bonini, Daniel
Fonte: Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP Publicador: Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP
Tipo: Dissertação de Mestrado Formato: application/pdf
Publicado em 30/06/2006 PT
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28.093057%
Terapia fotodinâmica (TFD) é uma modalidade terapêutica pouco invasiva e sem efeitos térmicos aprovada para o tratamento de doenças neoplásicas e vasculares proliferativas, capaz de produzir necrose tecidual seletiva através de administração de um fármaco fotossensibilizador seguido da aplicação de luz em comprimento de onda adequado. Na presença de luz o fotossensibilizador passa à forma ativada, e na presença de oxigênio molecular presente nas células, produz espécies reativas de oxigênio e oxigênio singleto que induzem as células alteradas à morte. O melhor entendimento dos mecanismos e da resposta celular à TFD, a disponibilidade de fontes de luz mais baratas, confiáveis e de fácil manuseio, bem como bons resultados em pesquisa clínica, dão credibilidade à técnica e a sua difusão na prática clínica. Estudos recentes em dosimetria têm mostrado melhores resultados terapêuticos com o fracionamento da dose de luz uma vez que permite a reoxigenação dos tecidos durante o período em que esse não está sendo iluminado. Neste estudo, investigou-se o dano tecidual (profundidade de necrose) e os danos celulares, especificamente na mitocôndria (estado 3, estado 4, taxa do controle respiratório, relação de ADP/O...

"Isolamento, estudo da atividade biológica e caracterização preliminares dos componentes majoritários do Photogem® por espectroscopia eletrônica na região do ultravioleta-visível e espectrometria de massa"; Insulation, evaluation of the biological activity and preliminary characterization of the major components of Photogem® UV-vis electronic and mass spectroscopy"

Sanchez, Marco Aurelio Andrade
Fonte: Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP Publicador: Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP
Tipo: Dissertação de Mestrado Formato: application/pdf
Publicado em 11/09/2006 PT
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38.396838%
O presente trabalho enfocou o isolamento, a análise da atividade biológica e a caracterização dos componentes majoritários do Photogem® através de Cromatografia Líquida de Alta Eficiência (CLAE), espectroscopia eletrônica na região do ultravioleta-visível (UV-Vis) e espectrometria de massa. O Photogem® é um derivado de hematoporfirina usado como fotossensibilizador em Terapia Fotodinâmica (TFD). O derivado de hematoporfirina é composto por uma mistura de monômeros, dímeros e oligômeros mas as estruturas químicas destes componentes ainda não estão bem caracterizadas. Empregou-se extração em fase sólida para limpeza e fracionamento dos componentes do Photogem®. As três frações principais foram separadas de acordo com suas respectivas polaridades. Em seguida, testes preliminares de atividade biológica foram desenvolvidos com as respectivas frações do Photogem® em células tumorais (HEp-2) e normais (VERO). A fração 2 apresentou citotoxicidade cinco vezes maior do que o Photogem® tanto nas células tumorais quanto nas células normais. Os componentes majoritários do Photogem® foram isolados por meio de cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE) e analisados por espectroscopia eletrônica na região do ultravioleta-visível (UV-Vis) e por espectrometria de massa. O componente que corresponde à fração 1 pode ser atribuído à hematoporfirina IX em função do seu espectro de absorção eletrônica (banda de Soret em 396nm e bandas Q em 497...

Avaliação da eficiência fotodinâmica de fotossensibilizadores com aplicação em terapia fotodinâmica; Assessing photodynamic efficiency of photosensitizers applicated in Photodynamic therapy

Silva, Renato Cavalcante da
Fonte: Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP Publicador: Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP
Tipo: Dissertação de Mestrado Formato: application/pdf
Publicado em 14/09/2007 PT
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28.197024%
Fotossensibilizadores são moléculas capazes de interagir com a luz de modo a gerar espécies altamente reativas de oxigênio como o oxigênio singlete e outras formas radicalares. Esta propriedade pode ser utilizada para o tratamento de câncer, remoção de contaminantes ambientais, inativação de agentes patogênicos no sangue e hemoderivados, bem como na esterilização alimentos. A técnica que utiliza o efeito fotodinâmico para o tratamento de câncer recebe o de nome Terapia Fotodinâmica (do termo em inglês: Photodynamic Therapy - PDT).Photofrin®, Photogem® e Photosan® são fármacos de primeira geração, derivados da hematoporfirina, que constituem o principal grupo de medicamentos com aplicação clínica em PDT. Photodithazine® é um fármaco de 2ª geração, derivado de clorina-e-6, que encontra-se em fase de testes clínicos e apresenta resultados promissores como fotossensibilizador (FS). Este trabalho tem o objetivo de investigar a eficiência fotodinâmica destes fármacos através de experimentos que envolvem a utilização da albumina de soro bovino (BSA) e o ácido úrico (AU) como dosímetros químicos; eritrócitos como modelo de membrana celular e a determinação do coeficiente de partição (P ou Log P) para se investigar lipofilicidade e a interação dos FS com as membranas celulares. Soluções contendo BSA e FS...

Influência do pH na interação do Photofrin®, Photogem® e Photosan® com DMPC e lipoproteína de baixa densidade; Influence of the pH in the interaction of Photofrin®, Photogem® and Photosan® with DMPC and low density lipoprotein

Natal, Aline Martins Duboc
Fonte: Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP Publicador: Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP
Tipo: Dissertação de Mestrado Formato: application/pdf
Publicado em 21/09/2007 PT
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38.019412%
O efeito do fotossensibilizador na estrutura biológica não é apenas influenciado por suas propriedades fotofísicas, mas também por sua interação específica com biosistemas.Além disso, a localização do fotossensibilizador no tecido tumoral é um importante fator que resulta em diferentes mecanismos de destruição do tumor. Muitos fotossensibilizadores, após administração sistêmica, se ligam às proteínas plasmáticas e com isso são distribuídos em diferentes sítios no organismo. Os fotossensibilizadores hidrofílicos são largamente transportados por albuminas e globilinas e se acumulam preferencialmente no estroma vascular dos tumores. Entretanto, fotossensibilizadores mais hidrofóbicos se ligam às lipoproteínas, principalmente LDL, que promove a entrada do FS na célula através de endocitose mediado por receptor. Sendo assim, a localização do FS depende de sua ligação com as deferentes proteínas plasmáticas, sua farmacocinética e também é influenciada pela diferença entre o tecido normal e tumoral. O tecido tumoral tem pH mais baixo e maior expressão de receptores de LDL do que os tecidos normais, aumentando a seletividade dos FSs as células tumorais. A incorporação de FS hidrofóbicos em lipossomas para a administração sistêmica pode realçar ao transporte deste pelas lipoproteínas. No presente trabalho estudou-se a influência do pH na interação de fotossensibilizadores com lipossomas de DMPC e LDL. Os fotossensibilizadores utilizados nesse estudo foram Photofrin®...

Estudo dos efeitos da terapia fotodinâmica sobre Streptococcus mutans; Study of effects of Photodynamic Antimicrobial Chemotherapy on Streptococcus mutans

Silva, Thiago Cruvinel da
Fonte: Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP Publicador: Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP
Tipo: Tese de Doutorado Formato: application/pdf
Publicado em 26/04/2010 PT
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18.370507%
Este estudo teve por objetivos (1) estudar os efeitos de diferentes parâmetros de terapia fotodinâmica sobre a viabilidade de células planctônicas e biofilme de S. mutans UA159, (2) verificar a viabilidade de uso de um modelo para crescimento de biofilme bacteriano no estudo do processo de desmineralização, (3) avaliar a capacidade da terapia fotodinâmica em controlar o processo de desmineralização mediado por biofilme de S. mutans crescidos sobre discos de dentina bovina e (4) mensurar a capacidade da terapia fotodinâmica em promover estresse celular a S. mutans UA159 com deleção do gene VicK. Os procedimentos de terapia fotodinâmica foram realizados pela associação do fotossensibilizador Photogem® e de um LED vermelho visível (Biotable®, 630 nm, 50 mW/cm2) como fonte de luz. A viabilidade de células bacterianas foi determinada por dois métodos distintos: teste de atividade metabólica pelo uso da resazurina (etapa 1) e contagem de UFC (etapas 1,2 e 3). Microrradiografia transversal e análise da concentração de cálcio por espectrometria de absorção atômica foram os métodos de escolha para a determinação do perfil do conteúdo mineral (%vol), perda mineral integrada (PMI, %vol x m), profundidade de lesão (PL...

Hipericina, Photodithazine e Photogem: um estudo comparativo da atividade fotodinâmica; Hypericin, Photodithazine e Photogem: a comparative study of the photodynamic activity

Bernal, Claudia
Fonte: Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP Publicador: Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP
Tipo: Tese de Doutorado Formato: application/pdf
Publicado em 19/04/2011 PT
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28.019412%
A Terapia Fotodinâmica (TFP) é uma técnica para tratamento de câncer que usa um fotossensibilizador (FS) na presença de luz e oxigênio gerando espécies altamente reativas de oxigênio que levam as células tumorais à morte.
Neste trabalho foi realizado um estudo comparativo com três FSs: Photogem® (PG), um derivado de hematoporfirina que está sendo usado em TFD no Brasil; Photodithazine® (PZ), um derivado hidrossolúvel de mono-L-aspartil clorina, que está na fase clínica para aprovação e Hipericina (HY), um pigmento fotoativo encontrado na planta Hypericum perforatum e usado na medicina popular que está sendo considerado como um promissor agente fotodinâmico para o tratamento de tumores. Este estudo utilizou uma Hipericina sintetizada no Brasil e diversos parâmetros para comparar os três FSs: a concentração inibitória média (IC50) em linhagens celulares; a constante de velocidade de fotoxidação da albumina de soro bovino na presença dos FSs e luz determinada pelo decréscimo na fluorescência da BSA em 340 nm; a fotoxidação do ácido úrico acompanhada pelo decréscimo da banda característica do ácido úrico em 290 nm após irradiação na presença dos FSs como uma estimativa indireta do rendimento quântico de formação de oxigênio singlete (ΔΦ); o rendimento quântico de fluorescência utilizando rodamina B como padrão; a acumulação dos FSs em células em função do tempo de incubação e a estimativa da quantidade de radicais livres formados após irradiação através da técnica de captura de spins. Todos os resultados obtidos evidenciam uma maior eficiência fotodinâmica da HY seguida pelo PZ e depois por Photogem e...

Estudo comparativo da terapia fotodinâmica utilizando laser CW e de femtossegundos em diferentes intensidades e comprimentos de onda; Comparative study of photodynamic therapy using CW and femtosecond laser at different intensities and wavelengths

Grecco, Clovis
Fonte: Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP Publicador: Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP
Tipo: Tese de Doutorado Formato: application/pdf
Publicado em 28/11/2013 PT
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27.787148%
A terapia fotodinâmica (TFD) é uma modalidade de tratamento para o câncer baseado na interação da luz com um agente fotossensibilizador (FS) e o oxigênio molecular presente na célula alvo. A TFD apresenta vantagens sobre os métodos tradicionais de tratamentos como o dano seletivo às células neoplásicas, ausência de intervenção cirúrgica, possibilidade de repetição do procedimento e efeitos colaterais controlados. Uma das limitações da técnica é a profundidade de pouca penetração da luz no tecido biológico e consequentemente o volume tecidual tratado. Uma alternativa para superar esta limitação é o emprego de fonte de luz pulsada que comparativamente a irradiação com luz contínua (CW), apresenta maior potência de pico levando a uma maior profundidade de penetração e maior formação de espécies reativas de oxigênio. O objetivo deste trabalho é a avaliação da TFD utilizando fonte de luz pulsada no regime de femtossegundos através de ensaios in vitro da fotodegradação de dois tipos de FSs e da necrose induzida em fígado sadio de ratos (estudos in vivo). Nos estudos in vitro foram avaliadas a fotodegradação do Photogem (PG - 8μg/mL) e do Photodithazine (PDZ - 6μg/mL), para as irradiâncias de 280...

Estudo da distribuição de doses limiares em TFD para um modelo de cultura tridimensional de células obtido pelo método de levitação magnética; Study of the threshold doses distribution in PDT using the three-dimensional cell cultures obtained by the method of magnetic levitation

Sabino, Luis Gustavo
Fonte: Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP Publicador: Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP
Tipo: Tese de Doutorado Formato: application/pdf
Publicado em 21/10/2014 PT
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27.787148%
Um conceito central na dosimetria da terapia fotodinâmica (TFD) é o limiar de dose (Dth do inglês threshold dose). O Dth é definido como a quantidade mínima de luz que deve ser absorvida pelas moléculas de fotossensibilizador (FS) dentro das células malignas a serem tratadas para que ocorra a morte celular por necrose ou apoptose. Os resultados do estudo da captação de FS por células Hep G2 demonstraram que uma população celular de linhagem, cultivada em monocamada, apresenta captação de Photogem (PG) heterogênea, ou seja, algumas células têm maior capacidade de captar moléculas de PG, outras células captam o PG em menor quantidade. A captação heterogênea de PG pode ser a causa para fenômenos de seleção de células mais resistentes à TFD. É razoável supor que as subpopulações celulares de uma mesma massa de células malignas possam apresentar diferentes valores de Dth. Definiu-se uma função de distribuição das doses limiares (g()) como uma função de distribuição gaussiana, e para a sua parametrização desenvolveu-se um método para o cultivo in vitro de culturas tridimensionais (culturas 3D), mais fidedignas ao tecido neoplásico maligno que as culturas tradicionais. Utilizando-se o método de levitação magnética (MLM) e o método de impressão magnética (MIM) para a dosimetria da TFD...

Photodynamic inactivation of four Candida species induced by photogem®

Dovigo, Lívia Nordi; Pavarina, Ana Cláudia; Ribeiro, Daniela Garcia; Adriano, Cynthia Sanchez; Bagnato, Vanderlei Salvador
Fonte: Sociedade Brasileira de Microbiologia Publicador: Sociedade Brasileira de Microbiologia
Tipo: Artigo de Revista Científica Formato: 42-49
ENG
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27.26456%
Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq); This study evaluated the in vitro susceptibility of C. albicans, C. dubliniensis, C. tropicalis and C. krusei to photodynamic therapy (PDT) induced by Photogem® and light emitting diode (LED). Suspensions of each Candida strain were treated with three photosensitizer (PS) concentrations (10, 25 and 50 mg/L) and exposed to 18.0, 25.5 and 37.5 J/cm² LED light fluences (λ ~ 455 nm). Control suspensions were treated only with PS concentrations, only exposed to the LED light fluences or not exposed to LED light or PS. Sixteen experimental conditions were obtained and each condition was repeated three times. From each sample, serial dilutions were obtained and aliquots were plated on Sabouraud Dextrose Agar. After incubation of plates (37 ºC for 48 hours), colonies were counted (cfu/mL) and the data were statistically analyzed by ANOVA and the Tukey test (α=0.05). Complete killing of C. albicans was observed after 18.0 J/cm² in association with 50 mg/L of PS. C. dubliniensis were inactivated after 18.0 J/cm² using 25 mg/L of PS. The inactivation of C. tropicalis was observed after photosensitization with 25 mg/L and subsequent illumination at 25.5 J/cm². For C. krusei...

Efeito citotóxico da Terapia Fotodinâmica associando Photogem e LED azul e vermelho em cultura de células normais

Ribeiro, Ana Paula Dias
Fonte: Universidade Estadual Paulista (UNESP) Publicador: Universidade Estadual Paulista (UNESP)
Tipo: Dissertação de Mestrado Formato: 194 f. : il. color. + anexo
POR
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28.235083%
Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES); Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP); Pós-graduação em Reabilitação Oral - FOAR; Para considerar a Terapia Fotodinâmica (PDT) como tratamento clínico da estomatite protética, é necessário conhecer tanto o potencial antifúngico, como efeito citotóxico desta terapia sobre células normais do indivíduo. Assim, o objetivo desse estudo in vitro foi avaliar a citotoxicidade da PDT antifúngica com o fotossensibilizador Photogem® associado ao LED azul e ao LED vermelho em cultura de fibroblastos L929 e células odontoblastóides MDPC-23. As células foram cultivadas (30.000 células/cm2) em placas de 24 compartimentos por 48 horas e ambos os tipos celulares foram incubados com Photogem® (0, 10, 25, 50, 100 ou 150 mg/L) e irradiados ou não pelo LED azul (460 ± 3 nm; 25,5 ou 37,5 J/cm2; 22 mW/cm2) ou LED vermelho (630 ± 3 nm; 70 ou 100 J/cm2; 25 mW/cm2) . O metabolismo celular foi determinado 0, 12 e 24 horas após a PDT utilizando o teste do metiltetrazolium (MTT), e a morfologia celular avaliada pela microscopia eletrônica de varredura (MEV). A técnica de citometria de fluxo foi utilizada para avaliar o tipo de morte celular (necrose ou apoptose) assim como estimar os níveis intracelulares das espécies reativas de oxigênio (EROs). Observou-se redução do metabolismo celular estatisticamente significante para todas as concentrações do Photogem® quando irradiadas em qualquer dose de luz...

Avaliação do efeito citotóxico da terapia fotodinâmica associada ao LED e ao Photogem sobre a mucosa bucal de rato

Trindade, Flávia Zardo
Fonte: Universidade Estadual Paulista (UNESP) Publicador: Universidade Estadual Paulista (UNESP)
Tipo: Dissertação de Mestrado Formato: 124 f. : il. color. + anexo
POR
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28.15069%
Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP); Pós-graduação em Reabilitação Oral - FOAR; A utilização da PDT para tratamento de diferentes tipos de infecções, tal como a candidose bucal, tem sido estudada. Entretanto, poucos são os dados científicos que relatam os possíveis efeitos tóxicos dessa terapia. Dessa forma, o objetivo deste estudo foi avaliar os efeitos da irradiação na mucosa bucal de ratos com LED azul (de 460 nm e potência de 200 mW/cm2) em presença do fotossensibilizador (FS) Photogem®, em duas diferentes concentrações (500 mg/L e 1000 mg/L). Para isso, foram utilizados 101 ratos (Rattus Norvegicus Albinus Holtzman) distribuídos em 6 grupos, de acordo com os seguintes tratamentos: Grupo 1 – controle; Grupo 2 – aplicação do FS (500 mg/L); Grupo 3 – aplicação do FS (500 mg/L) e irradiação com LED; Grupo 4 - aplicação do FS (1000 mg/L); Grupo 5 – aplicação do FS (1000 mg/L) e irradiação com LED; e Grupo 6 – irradiação com LED. O FS foi aplicado por 30 minutos (tempo de pré-incubação) e o tempo de irradiação da mucosa foi de 20 minutos (dose de 144 J/cm2). Decorridos os 4 períodos de avaliação propostos (0 dia, 1dia, 3 dias e 7 dias), os animais tiveram a mucosa palatina fotografada para análise macroscópica...

Photodynamic inactivation of four Candida species induced by photogem®

Dovigo,Lívia Nordi; Pavarina,Ana Cláudia; Ribeiro,Daniela Garcia; Adriano,Cynthia Sanchez; Bagnato,Vanderlei Salvador
Fonte: Sociedade Brasileira de Microbiologia Publicador: Sociedade Brasileira de Microbiologia
Tipo: Artigo de Revista Científica Formato: text/html
Publicado em 01/03/2010 EN
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27.26456%
This study evaluated the in vitro susceptibility of C. albicans, C. dubliniensis, C. tropicalis and C. krusei to photodynamic therapy (PDT) induced by Photogem® and light emitting diode (LED). Suspensions of each Candida strain were treated with three photosensitizer (PS) concentrations (10, 25 and 50 mg/L) and exposed to 18.0, 25.5 and 37.5 J/cm² LED light fluences (λ ~ 455 nm). Control suspensions were treated only with PS concentrations, only exposed to the LED light fluences or not exposed to LED light or PS. Sixteen experimental conditions were obtained and each condition was repeated three times. From each sample, serial dilutions were obtained and aliquots were plated on Sabouraud Dextrose Agar. After incubation of plates (37 ºC for 48 hours), colonies were counted (cfu/mL) and the data were statistically analyzed by ANOVA and the Tukey test (α=0.05). Complete killing of C. albicans was observed after 18.0 J/cm² in association with 50 mg/L of PS. C. dubliniensis were inactivated after 18.0 J/cm² using 25 mg/L of PS. The inactivation of C. tropicalis was observed after photosensitization with 25 mg/L and subsequent illumination at 25.5 J/cm². For C. krusei, none of the associations between PS and light resulted in complete killing of this species. PDT proved to be effective for the inactivation of C. albicans...

Photodynamic inactivation of four Candida species induced by photogem®

Dovigo, Lívia Nordi; Pavarina, Ana Cláudia; Ribeiro, Daniela Garcia; Adriano, Cynthia Sanchez; Bagnato, Vanderlei Salvador
Fonte: Sociedade Brasileira de Microbiologia Publicador: Sociedade Brasileira de Microbiologia
Tipo: Artigo de Revista Científica
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This study evaluated the in vitro susceptibility of C. albicans, C. dubliniensis, C. tropicalis and C. krusei to photodynamic therapy (PDT) induced by Photogem®and light emitted diode (LED). Suspensions of each Candida strain were treated with three photosensitizer (PS) concentrations (10, 25 and 50 mg/L) and exposed to 18, 25.5 and 37.5 J/cm2 LED light fluences (λ ~ 455 nm). Control suspensions were treated only with PS concentrations, only exposed to the LED light fluences or not exposed to LED light or PS. Sixteen experimental conditions were obtained and each condition was repeated three times. From each sample, serial dilutions were obtained and aliquots were plated on Sabouraud Dextrose Agar. After incubation of plates (37 °C for 48 hours), colonies were counted (cfu/mL) and the data were statistically analyzed by ANOVA and the Tukey test (α=0.05). Complete killing of C. albicans was observed after 18 J/cm2 in association with 50 mg/L of PS. C. dubliniensis were inactivated after 18 J/cm2 using 25 mg/L of PS. The inactivation of C. tropicalis was observed after photosensitization with 25 mg/L and subsequent illumination at 25.5 J/cm2. For C. krusei, none of the associations between PS and light resulted in complete killing of this species. PDT proved to be effective for the inactivation of C. albicans...