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Microbiological Assay for Apramycin Soluble Powder

LOURENCO, Felipe R.; BARBOSA, Elisabete A.; PINTO, Terezinha J. A.
Fonte: COLEGIO FARMACEUTICOS PROVINCIA DE BUENOS AIRES Publicador: COLEGIO FARMACEUTICOS PROVINCIA DE BUENOS AIRES
Tipo: Artigo de Revista Científica
ENG
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684.1609%
The aim of this study was to validate an agar diffusion method through the parameters linearity, precision and accuracy, to quantify apramycin in soluble powder. The calibration curve of apramycin was constructed by plotting log of concentrations (mu g ml(-1)) versus zone diameter (mm) and shows good linearity in the range of 1.0-4.0 mu g.ml(-1). The precision of the assay was determined by assaying samples at the same day (repeatability - R.S.D. = 2.00%) and on different days (intermediate precision - R.S.D. = 5.06%) and indicate good precision. The accuracy expresses the agreement between the accepted value and the value found. The mean recovery was found to be 100.49 % for apramycin soluble powder. The results indicated that the microbiological assay proposed in this work hold linearity, precision and accuracy being an acceptable alternative method for routine quality control of apramycin in the pharmaceutical dosage form studied.

Doseamento microbiológico de gentamicina por difusão em agar - proposta de delineamento experimental; Microbiological assay of gentamicin sulfate by agar diffusion - proposal of experimental design

Lourenço, Felipe Rebello
Fonte: Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP Publicador: Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP
Tipo: Dissertação de Mestrado Formato: application/pdf
Publicado em 18/12/2006 PT
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581.43582%
A gentamicina é um complexo antibiótico de largo espectro, produzido por actinomicetos do gênero Micromonospora e classificado entre os antibióticos aminoglicosídeos, utilizado no tratamento de infecções graves, devidas a microrganismos Gram-negativos. Alterações da sua atividade antimicrobiana, não demonstradas pelos ensaios químicos, podem ser avaliadas pelos ensaios microbiológicos. O objetivo deste trabalho foi comparar os delineamentos experimentais 5 x 1, 2 x 2 e 3 x 1, avaliando-se os parâmetros de validação de especificidade, linearidade, faixa ou intervalo, precisão e exatidão para cada delineamento experimental em diferentes níveis de concentração, apresentações e lotes. O plano de trabalho constituiu-se na realização de 81 ensaios (em 3 réplicas) de doseamento microbiológico de gentamicina. As concentrações das soluções empregadas foram preparadas numa faixa de 1,0 µg/mL a 5,0 µg/mL, diluídos em tampão fosfato 0,1 M pH 8,0. O meio utilizado foi o meio antibiótico no. 11, com Staphyloccocus epidermidis (ATCC 12228). Empregou-se 21 mL de meio como camada base e 4 mL de meio inoculado à 1% como camada superfície. As placas foram incubadas por 16-18 horas à 37 ± 1 °C. Os três delineamentos empregados apresentaram especificidade adequada para análise de creme dermatológico e solução injetável contendo sulfato de gentamicina. Também apresentaram exatidão e linearidade no intervalo avaliado. Os delineamentos não apresentaram diferença significativa quanto a precisão. Os resultados foram comparados através da determinação de índices de capacidade do sistema de medição. A análise estatística demonstrou que não há diferença significativa entre os resultados obtidos pelos delineamentos 5 x 1...

Doseamento microbiológico de vancomicina - desenvolvimento e validação de método empregando leitura cinética em microplacas; Microbiological assay of vancomycin - development and validation method using kinetic reading microplate

Botelho, Túlia de Souza
Fonte: Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP Publicador: Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP
Tipo: Dissertação de Mestrado Formato: application/pdf
Publicado em 28/01/2011 PT
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685.8442%
O ensaio turbidimétrico tem como princípio a redução da densidade óptica em suspensões microbianas, decorrente o incremento na concentração do antibiótico. No ensaio convencional trabalha-se com tubos de ensaio que demandam longo tempo para visualização da resposta. Assim, o método empregando microplacas com leitura cinética para a dosagem de antibióticos é de interesse considerável, uma vez que possibilita reduzir quantidade de material e tempo de análise necessários e permite o ensaio de grande número de amostras simultaneamente, com leitura e cálculo automatizado. O objetivo deste trabalho é desenvolver o método de doseamento microbiológico de vancomicina empregando microplacas e modo de leitura cinético, assim como validar o método desenvolvido, através da avaliação dos parâmetros de especificidade e seletividade, linearidade, faixa ou intervalo linear, exatidão e precisão. Adicionalmente foi contemplado desenvolvimento paralelo entre o método convencional e o cinético, de forma a permitir respaldo positivo quanto à validação. Sendo assim, através do estudo dos parâmetros de validação do método cinético, trabalhou-se em condições estabelecidas abrangendo curva-padrão de vancomicina com concentrações entre 0...

Aspectos da qualidade da tetraciclina em preparações farmacêuticas sólidas. Correlação entre os métodos de dosagem por cromatografia líquida de alta eficiência e turbimético; Aspects of the quality of tetracycline in solid pharrnaceutical forrnulations. Correlation between HPLC and microbiological methods

Yamamoto, Célia Hitomi
Fonte: Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP Publicador: Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP
Tipo: Tese de Doutorado Formato: application/pdf
Publicado em 26/03/1999 PT
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590.5315%
As tetraciclinas são encontradas no mercado sob várias formas farmacêuticas, sendo provenientes de diversos laboratórios farmacêuticos. Com o objetivo de avaliar a qualidade destes medicamentos, foram realizados os ensaios de dissolução in vitro e determinação quantitativa. Um total de 38 amostras de cápsulas de cloridrato de tetraciclina, fosfato de tetraciclina e cloridrato de oxitetraciclina e drágea de cloridrato de doxiciclina, englobando 12 fabricantes, foram analisadas. A dissolução do princípio ativo foi determinada para todas as amostras, conforme o método recomendado pela USP XXIII. Das amostras, duas foram reprovadas e outras quatro foram aprovadas após o reteste. A variação dos valores individuais obtidos no ensaio de dissolução para cada amostra, foi significativa, apresentando coeficiente de variação de até 14,2 %. A determinação quantitativa através do método microbiológico turbidimétrico empregando Staphylococcus aureus ATCC 29737, resultou em duas amostras de um mesmo fabricante com potência muito abaixo do limite especificado de 90 a 125 % do valor rotulado, com 55.5 e 68,7 %. Estudo comparativo desta metodologia com o método de cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE) foi realizado. Para isto...

Desenvolvimento e validação de doseamento microbiológico por método de difusão em ágar - cilindros em placas para doripenem pó para solução injetável; Development and validation of microbiological assay by agar diffusion method - cylinder plate for doripenem powder for injectable solution

Führ, Fernanda
Fonte: Universidade Federal do Rio Grande do Sul Publicador: Universidade Federal do Rio Grande do Sul
Tipo: Trabalho de Conclusão de Curso Formato: application/pdf
POR
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681.676%
The carbapenems are a class of -lactam antibiotics that present action against Gram-positive and Gram-negative bacteria. Doripenem is a new carbapenem that has few published studies for the quantitative determination and there isn’t monograph in the Official Codes. Therefore, this study aims to develop and validate microbiological assay for quality control of the drug powder for injectable solution. The parameters analyzed during validation were linearity (r=0.99999), repeatability (RSD=1.74%), intermediate precision (RSD=3.12%), accuracy (98.90 to 101.51%), specificity and robustness. The results show that the method is suitable for quality control of doripenem powder for injectable solution.

Microbiological assay for gatifloxacin in pharmaceutical formulations

Salgado, HRN; Lopes, CCGO; Lucchesi, MBB
Fonte: Elsevier B.V. Publicador: Elsevier B.V.
Tipo: Artigo de Revista Científica Formato: 443-446
ENG
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681.676%
A simple, sensitive and specific agar diffusion bioassay for the antibacterial gatifloxacin was developed using a strain of Bacillus subtilis ATCC 9372 as the test organism. Gatifloxacin could be measured in tablets and raw material at concentration ranging 4-16 mu g ml(-1). The calibration graph for gatifloxacin was linear from 4.0 to 16.0 mu g ml(-1). A prospective validation of the method demonstrated that the method was linear (r(2) = 0.9993), precise (R.S.D. = 1.14%) and accurate. The results confirmed its precision and did not differ significantly from others methods described in the literature. The validated method yielded good results in terms of the range, linearity, precision, accuracy, specificity and recovery. We concluded that the microbiological assay is satisfactory for in vitro quantification of the antibacterial activity of gatifloxacin. (c) 2005 Elsevier B.V. All rights reserved.

Microbiological assay for the determination of azithromycin in ophthalmic solutions

Salgado, Hérida Regina Nunes; Roncari, Ana Flávia Ferreira
Fonte: Universidade Estadual Paulista Publicador: Universidade Estadual Paulista
Tipo: Artigo de Revista Científica Formato: 544-549
ENG
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685.4738%
The validation of a simple, sensitive and specific agar diffusion bioassay, applying cylinder-plate method, for the determination of the antibiotic azithromycin in ophthalmic solutions is described. Using a strain of Bacillus subtilis ATCC 9372 as the test organism, azithromycin at concentrations ranging from 50.0 to 200.0 μg·mL-1 could be measured in 1.666 7 mg·mL-1 ophthalmic solutions. A prospective validation of the method showed that the method was linear (r = 0.999 9) and precise (RSD = 0.70) and accurate (it measured the added quantities). The results obtained by bioassay method could be statistically calculated by linear parallel model and by means of regression analysis and verified using analysis of variance (ANOVA). We conclude that the microbiological assay is satisfactory for quantification of azithromycin in ophthalmic solutions.

Validation of microbiological assay for determination of cefuroxime in injectable preparations

Vieira, Daniela C.M.; Ricarte, Patrícia C.; Salgado, Hérida R.N.
Fonte: Universidade Estadual Paulista Publicador: Universidade Estadual Paulista
Tipo: Artigo de Revista Científica Formato: 746-750
ENG
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687.95875%
The validation of a microbiological assay, applying agar diffusion method for determination of the active of cefuroxime in power for injection, is described. Using a strain of Micrococcus luteus ATCC 9341 as the test organism, cefuroxime was measured in concentrations ranging from 30.0 to 120.0 μg/mL. The method validation showed that it is linear (r = 0.9999), precise (relative standard deviation = 0.37%) and accurate (it measured the added quantities). Microbiological assay is satisfactory for quantitation of cefuroxime in powder for injection and the validity of the proposed bioassay, which is a simple and a useful alternative methodology for cefuroxime determination in routine quality control.

Development and validation of a microbiological assay for determination of chlorhexidine digluconate in aqueous solution

Fiorentino, Flávia Angélica Másquio; Corrêa, Marcos Antonio; Salgado, Hérida Regina Nunes
Fonte: Universidade Estadual Paulista Publicador: Universidade Estadual Paulista
Tipo: Artigo de Revista Científica Formato: 351-358
ENG
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687.95875%
Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq); Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES); Chlorhexidine (CHX) is a broad-spectrum antiseptic that is used in many topical pharmaceutical formulations. Because there is no official microbiological assay reported in the literature that is used to quantify CHX, this paper reports the development and validation of a simple, sensitive, accurate and reproducible agar diffusion method for the dosage of chlorhexidine digluconate (CHX-D) in an aqueous solution. The assay is based on the inhibitory effect of CHX-D upon the strain of Staphylococcus aureus ATCC 25923, which is used as the test microorganism. The design 3x3 parallel-line model was used. The results were treated statistically by analysis of variance (ANOVA), and they were excellent in terms of linearity (r = 0.9999), presenting a significant regression between the zone diameter of growth inhibition and the logarithm of the concentration within the range of 0.5 to 4.5%. The results obtained were precise, having relative standard deviations (RSD) for intra-day and inter-day precision of 2.03% and 2.94%, respectively. The accuracy was 99.03%. The method proved to be very useful and appropriate for the microbiological dosage of CHX-D in pharmaceutical formulations; it might also be used for routine drug analysis during quality control in pharmaceutical industries.

Microbiological Assay for the Determination of Colistin Sulphate

Calixto, Giovana; Domingos, Luciana Elisete; Fabri, Nathalie Thomazini; Carmo, Thais Adriana do; Moreno, Andreia de Haro; Nunes Salgado, Herida Regina; Chorilli, Marlus
Fonte: Bentham Science Publ Ltd Publicador: Bentham Science Publ Ltd
Tipo: Artigo de Revista Científica Formato: 443-448
ENG
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689.6421%
Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq); An innovative microbiological assay was developed for the determination of colistin sulphate at various concentrations (192-469 IU/mL); using Bordetella bronchiseptica ATCC 4617 as microorganism test. This assay revealed subtle changes not demonstrated by chemical methods, such as chemical degradation and low of potency, but by evaluating the potency of colistin, which is very important for the analysis of antibiotics. The method was validated according to ICH guidelines, proving to be linear ( r(2) = 0.9985), precise ( CV = 1.32%) and accurate ( 100.9 +/- 1.33%). It was concluded that the microbiological assay is satisfactory for in vitro quantitation of the antibacterial activity of colistin sulphate.

Validated microbiological and HPLC methods for the determination of moxifloxacin in pharmaceutical preparations and human plasma

Abdelaziz,Ahmed A.; Elbanna,Tarek E.; Gamaleldeen,Noha M.
Fonte: Sociedade Brasileira de Microbiologia Publicador: Sociedade Brasileira de Microbiologia
Tipo: Artigo de Revista Científica Formato: text/html
Publicado em 01/12/2012 EN
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487.95875%
The article presents a comparison between microbiological and high performance liquid chromatographic (HPLC) assays for quantification of moxifloxacin in tablets, ophthalmic solutions and human plasma. The microbiological method employed a cylinder-plate agar diffusion assay using a strain of Esherichia coli ATCC 25922 as the test organism and phosphate buffer (pH8) as the diluent. The calibration curves were linear (R²> 0.98) over a concentration range of 0.125 to 16 µgml-1. The within day and between days precisions were < 4.47% and < 6.39% respectively. Recovery values were between 89.4 and 110.2%. The HPLC assay used Hypersil® BDS C18 reversed phase column (250×4.6 mm, 5µm) with a mobile phase comprising 20 mM ammonium dihydrogen orthophosphate (pH3) and acetonitrile (75:25) and flowing at 1.5 ml/min. The detection was at 295nm. The calibration curves were linear (R²> 0.999) over the range of 0.125 to 16 µg ml-1. The within day and between days precisions were < 4.07% and < 5.09% respectively. Recovery values were between 97.7 and 107.6%. Similar potencies were obtained after the analysis of moxifloxacin tablets and ophthalmic solutions by both methods. Also pharmacokinetic parameters were calculated after the analysis of plasma samples of six male healthhy volunteers by both validated methods.

Development and validation of a microbiological assay for determination of chlorhexidine digluconate in aqueous solution

Fiorentino,Flávia Angélica Másquio; Corrêa,Marcos Antonio; Salgado,Hérida Regina Nunes
Fonte: Universidade de São Paulo, Faculdade de Ciências Farmacêuticas Publicador: Universidade de São Paulo, Faculdade de Ciências Farmacêuticas
Tipo: Artigo de Revista Científica Formato: text/html
Publicado em 01/06/2013 EN
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687.95875%
Chlorhexidine (CHX) is a broad-spectrum antiseptic that is used in many topical pharmaceutical formulations. Because there is no official microbiological assay reported in the literature that is used to quantify CHX, this paper reports the development and validation of a simple, sensitive, accurate and reproducible agar diffusion method for the dosage of chlorhexidine digluconate (CHX-D) in an aqueous solution. The assay is based on the inhibitory effect of CHX-D upon the strain of Staphylococcus aureus ATCC 25923, which is used as the test microorganism. The design 3x3 parallel-line model was used. The results were treated statistically by analysis of variance (ANOVA), and they were excellent in terms of linearity (r = 0.9999), presenting a significant regression between the zone diameter of growth inhibition and the logarithm of the concentration within the range of 0.5 to 4.5%. The results obtained were precise, having relative standard deviations (RSD) for intra-day and inter-day precision of 2.03% and 2.94%, respectively. The accuracy was 99.03%. The method proved to be very useful and appropriate for the microbiological dosage of CHX-D in pharmaceutical formulations; it might also be used for routine drug analysis during quality control in pharmaceutical industries.

A fully validated microbiological assay to evaluate the potency of ceftriaxone sodium

Manfio,Maria Luisa; Agarrayua,Danielle Araújo; Machado,Jaison Carlosso; Schmidt,Cleber Alberto
Fonte: Universidade de São Paulo, Faculdade de Ciências Farmacêuticas Publicador: Universidade de São Paulo, Faculdade de Ciências Farmacêuticas
Tipo: Artigo de Revista Científica Formato: text/html
Publicado em 01/12/2013 EN
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684.1609%
Ceftriaxone (CFTX) sodium is a third-generation, broad-spectrum cephalosporin that is resistant to beta-lactamases. An alternative bioassay for the assessment of the potency of this drug in pharmaceutical formulations has not been previously reported. Thus, this paper reports the development and full validation of a 3 x 3 agar diffusion bioassay using a cylinder-plate method to quantify CFTX sodium in pharmaceutical samples. The strain Staphylococcus aureus ATCC 6538P was used as the test microorganism, and the results of the proposed bioassay displayed high linearity, precision, accuracy, specificity and robustness. All potency results were statistically analyzed using an analysis of variance (ANOVA) and were found to be linear (r=0.99999) in the range of 16-64 µg/mL, accurate (100.5%), and precise [repeatability: relative standard deviation (RSD)=1.4%; intermediate precision: between-day RSD=2.1% and between-analyst RSD=2.5%]. The specificity of the bioassay was determined by evaluating a degraded sample (50 ºC) at 0, 24 and 48 hours as compared against the results from the pharmacopeial liquid chromatography method for CFTX. The results validated the proposed microbiological assay, which allows reliable quantitation of CFTX in pharmaceutical samples. Moreover...

Comparison of a radioimmunoassay and a microbiological assay for measurement of serum vancomycin concentrations.

Crossley, K B; Rotschafer, J C; Chern, M M; Mead, K E; Zaske, D E
Fonte: PubMed Publicador: PubMed
Tipo: Artigo de Revista Científica
Publicado em /04/1980 EN
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497.61277%
A newly developed radioimmunoassay was used to measure the concentration of vancomycin in 137 specimens of serum from patients being treated with this antibiotic. Of these sera, 84 were also analyzed with a microbiological assay technique for vancomycin. Duplicate determinations were done with each of the techniques. Individual values and averaged values for both methods were used for statistical analyses. The correlation coefficients between all possible combinations of radioimmunoassay and microbiological assay results for the 84 sera were greater than or equal to 0.99 (P less than 0.01). Values for the regression coefficients of radioimmunoassay results on microbiological assay results ranged from 0.98 +/- 0.01 to 1.03 +/- 0.01. The mean percent deviation of radioimmunoassay versus microbiological assay results was -1.56 +/- 0.60. A one-way analysis of variance demonstrated that the use of different standard curves for each batch of specimens assayed by microbiological assay did not significantly influence the results (P = 0.07). The microbiological assay and the radioimmunoassay for measurement of serum vancomycin levels yielded essentially identical results.

Automated microbiological assay of thiamin in serum and red cells.

Icke, G; Nicol, D
Fonte: PubMed Publicador: PubMed
Tipo: Artigo de Revista Científica
Publicado em /07/1994 EN
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487.06%
AIMS--To develop a sensitive, direct, automated method for the measurement of serum and red cell thiamin. METHODS--A microbiological assay using a chloramphenicol resistant strain of Lactobacillus fermenti as the test organism was developed. Addition of chloramphenicol and cycloheximide to the assay medium suppressed bacterial and yeast contamination and enabled tests to be automated without recourse to aseptic procedures. Evaluation of the assay included precision analysis and estimation of thiamin recovery. Results obtained on red cell extracts were compared with an established colorimetric (thiochrome) method. RESULTS--Acceptable intrabatch and interbatch precision was obtained and good recovery of thiamin added to serum was obtained. Non-parametric reference ranges based on the results from 505 healthy people were: serum thiamin 11.3-35.0 nmol/l and red cell thiamin 190-400 nmol/l. Results were not age or gender related. The method gave results for red cell thiamin which were significantly higher than those obtained with an established thiochrome method. CONCLUSIONS--This automated microbiological assay is sensitive to 2.0 nmol/l of thiamin and allows tests to be set up at the rate of 100 per hour and after 20-22 hours allows incubation results to be read at 60 per hour. The method has proved reliable...

Métodos espectrofotométrico, RP-UPLC e microbiológico para determinação de linezolida em formas farmacêuticas; Spectrophotometric, RP-UPLC and microbiological methods for determination of linezolida in pharmaceutical preparations

Saviano, Alessandro Morais
Fonte: Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP Publicador: Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP
Tipo: Dissertação de Mestrado Formato: application/pdf
Publicado em 23/10/2015 PT
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585.47383%
A linezolida é um antibiótico oxazolidinona efetivo contra bactérias patogênicas gram-positivas, incluindo Staphylococcus aureus resistente a meticilina (MRSA), Staphylococcus aureus resistente a glicopeptídeos (GISA) e enterococci resistente a vancomicina (VRE). As oxazolidinonas inibem a translação bacteriana na fase de iniciação da síntese de proteínas, enquanto que a síntese de RNA e DNA não são afetadas. Diversos métodos por cromatografia líquida de alta-eficiência (HPLC) têm sido relatados para a determinação da concentração de linezolida em plasma humano, soro e urina. Entretanto, um número pequeno de métodos estão disponíveis para a determinação de linezolida em formulações farmacêuticas. O objetivo deste trabalho foi desenvolver e validar métodos espectrofotométrico, de cromatografia líquida de ultraeficiência em fase reversa (RP-UPLC), doseamento microbiológico em placas e doseamento microbiológico rápido em microplacas com leitura cinética para a determinação de linezolida em soluções injetáveis e comprimidos. Adicionalmente, foram identificadas e quantificadas as principais fontes de incerteza relacionadas aos métodos. O desenvolvimento dos métodos utilizou uma abordagem racional...

Doseamento microbiológico de nistatina: desenvolvimento e validação de método empregando leitura cinética em microplaca; Microbiological assay of nistatin: development and validation of a method employing kinetic micro-plate reading

Pedroso, Carmen Rosa Jamil
Fonte: Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP Publicador: Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP
Tipo: Dissertação de Mestrado Formato: application/pdf
Publicado em 09/09/2014 PT
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689.6421%
A FDA tem incentivado a indústria farmacêutica a implantar no seu sistema de controle de qualidade métodos rápidos para avaliação do produto durante seu processo de produção e/ou na sua forma final para comercialização. Na indústria farmacêutica, o doseamento microbiológico é amplamente utilizado pelo setor de Controle de Qualidade com objetivo de avaliar a eficácia e segurança do medicamento produzido, principalmente no que diz respeito a produção de antibióticos. No caso desses, a aplicabilidade de métodos rápidos é de suma importância a fim de se obter uma avaliação rápida e confiável do produto, garantindo assim a comercialização de medicamentos com a qualidade e segurança necessárias para o sucesso do tratamento terapêutico. O objetivo deste trabalho foi desenvolver e validar método para doseamento microbiológico de nistatina, com leitura cinética em microplaca, perfeitamente intercambiável com o método tradicional de difusão em ágar, porém com redução do tempo de execução e de liberação do resultado final. Os parâmetros definidos para este ensaio foram: utilização de inóculo com 5% de Candida albicans (ATCC 10231), meio de cultura líquido, tempos de 48 horas para crescimento do micro-organismo e 8 horas para leitura das micro-placas...

Microbiological assay on microtitre plates of folate in serum and red cells.

O'Broin, S.; Kelleher, B.
Fonte: PubMed Publicador: PubMed
Tipo: Artigo de Revista Científica
Publicado em /04/1992 EN
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489.752%
AIMS: To develop a simple microbiological assay for serum and red cell folates on 96-well microtitre plates, suitable for use in routine clinical diagnosis. METHODS: Use of a chloramphenicol resistant organism (NCIB 10463) saved time by avoiding aseptic precautions. Use of plate sealers facilitated mixing. Evaluation of assay performance included estimations of folate recovery, assay reproducibility, and response to reduced folate. Results obtained on sera (193) and red cell folates (150) were compared with those obtained using a traditional microbiological assay. RESULTS: Good recovery of folic acid added to serum and also good interassay and intra-assay precision were obtained with both serum (CV% of less than 5) and red cell folate pools (CV% of less than 5). Equimolar assay responses were obtained with folic acid, 5-formyltetrahydrofolate (L-form), and 5-methyltetrahydrofolate (L-form). The microassay correlated well with a traditional assay for estimation of folate in both serum (n = 193, r = 0.975) and red cells (n = 150, r = 0.96). CONCLUSIONS: This assay is more compact and less time consuming than the traditional assay. It is extremely economical and is easy to perform in a routine clinical laboratory.

A microbiological assay method for p-aminobenzoic acid

Thompson, Roy C.; Isbell, Edith R.; Mitchell, Herschel K.
Fonte: American Society for Biochemistry and Molecular Biology Publicador: American Society for Biochemistry and Molecular Biology
Tipo: Article; PeerReviewed Formato: application/pdf
Publicado em /05/1943
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485.8442%
Since the establishment of p-aminobenzoic acid as a member of the B vitamin group, a considerable interest has been shown in methods of determination in natural materials. Since known chemical methods are not sufficiently sensitive, it became evident that microbiological tests should be the most practicable. The organism Clostridium acetobutylicum has been used (1) but no general assay procedure has been presented. Several bacterial strains which respond to p-aminobenzoic acid have been investigated in this laboratory, but satisfactory assay procedures with these organisms have not yet been devised. For the discovery of the test organism used in the procedure described in this paper, we are indebted to Dr. Beadle and Dr. Tatum who kindly furnished us with a culture of their p-aminobenzoic acid requiring a mutant strain of Neurospora crassa, designated by them as Neurospora crassa p-aminobenzoicless No. 1633 (2). This mold will grow optimally on a medium consisting of inorganic salts, ammonium tartrate, sucrose, biotin, and p-aminobenzoic acid. For purposes of assay, however, it has proved advantageous to supplement this basal medium with natural extracts which are either naturally low in p-aminobenzoic acid or have been treated to remove it. With such a complex medium...

Development and validation of a microbiological assay for determination of chlorhexidine digluconate in aqueous solution

Fiorentino, Flávia Angélica Másquio; Corrêa, Marcos Antonio; Salgado, Hérida Regina Nunes
Fonte: Universidade de São Paulo. Faculdade de Ciências Farmacêuticas Publicador: Universidade de São Paulo. Faculdade de Ciências Farmacêuticas
Tipo: info:eu-repo/semantics/article; info:eu-repo/semantics/publishedVersion; ; ; ; ; ; Formato: application/pdf
Publicado em 01/06/2013 ENG
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687.95875%
Clorexidina (CHX) é um antisséptico com amplo espectro de ação utilizada em muitos tipos de preparações farmacêuticas para uso tópico. Uma vez que não há na literatura ensaio microbiológico oficial para quantificar a clorexidina, este trabalho objetivou o desenvolvimento e validação de um ensaio microbiológico simples, sensível, exato e reprodutível, por difusão em ágar, para doseamento de digliconato de clorexidina (CHX-D) em solução aquosa. O ensaio é baseado no efeito da inibição de Staphylococcus aureus ATCC 25923, utilizado como microorganismo teste, pela CHX-D. Utilizou-se o delineamento 3x3. Os resultados foram verificados estatisticamente pela análise de variância (ANOVA) e apresentaram excelente linearidade (r = 0,9999), demonstrando que o método segue o modelo linear com regressão significativa entre o diâmetro da zona de inibição e o lagaritmo da concentração no intervalo de 0,5 a 4,5%. Os resultados obtidos foram precisos apresentando desvio padrão relativo (DPR) para precisão intra-dia de 2,03% e DPR para precisão inter-dias de 2,94%. A exatidão foi 99,03%. O método provou ser muito útil e apropriado para doseamento microbiológico da CHX-D em formas farmacêuticas e pode ser empregado para análise desta substância no controle de qualidade em indústrias farmacêuticas.; Chlorhexidine (CHX) is a broad-spectrum antiseptic that is used in many topical pharmaceutical formulations. Because there is no official microbiological assay reported in the literature that is used to quantify CHX...