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Potencial apoptótico de uma nova clorina anfifílica como fotossensibilizador para terapia fotodinâmica; Apoptotic potential of a new amphiphilic chlorine as photosensitizer for photodynamic therapy

Moritz, Milene Nóbrega de Oliveira
Fonte: Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP Publicador: Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP
Tipo: Dissertação de Mestrado Formato: application/pdf
Publicado em 20/05/2014 PT
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A Terapia Fotodinâmica (PDT) é uma técnica utilizada para tratar vários tipos de tumores em que a luz estimula um fotossensibilizador (FS) a gerar espécies reativas de oxigênio (ROS) que levam à morte celular por apoptose ou necrose. A partir de uma clorina (CHL), cuja nomenclatura é metilfeoforbídio, visando torná-la mais anfifílica foi adicionado o grupo TRISMA (CHL-T). Os vários parâmetros usados na PDT (tipo de FS, concentração do FS, tempo de incubação do FS e dose de luz) podem desencadear diferentes vias para apoptose. Poucos estudos sobre o tipo de morte celular induzido com clorinas têm sido realizados. Diante disso, o objetivo deste estudo foi determinar a citotoxicidade dessa nova clorina, assim como identificar o tipo de morte celular envolvido na PDT e elucidar a participação da proteína apoptótica p53 nesse processo comparando-se com CHL e HY. A hipótese principal deste trabalho é que esta nova clorina modificada tem maior eficiência na indução de apoptose. Para testar esta hipótese, foi avaliada a indução de apoptose por microscopia de fluorecência e por citometria e a citotoxicidade pelo ensaio do MTT de três FSs: uma clorina (CHL), a clorina modificada (CHL-T) e a hipericina (HY). As clorinas apresentaram maior acumulação para as duas linhagens celulares quando comparada com a hipericina. A fototoxicidade apresentada pela nova clorina foi cerca de 10 a 20 vezes maior que a clorina de origem (CHL) nas duas linhagens celulares como demonstrado pelos resultados do ensaio com MTT. Os testes realizados por microscopia de fluorescência resultaram numa porcentagem de morte celular crescente com o aumento das concentrações diferenciando maior apoptose causada por PDT com CHL-T nas células HEp-2 e maior necrose nas células HeLa. A análise da apoptose por citometria também apresentou um efeito muito superior da CHL-T em relação aos demais FSs estudados para apoptose inicial (80...

Efeitos clínicos, microbiológicos e imunológicos da terapia fotodinâmica antimicrobiana no tratamento não cirúrgico da periodontite agressiva: um estudo clínico do tipo boca-dividida, controlado, aleatorizado e duplo-cego; Clinical, microbiological and immunological effects of antimicrobial Photodynamic Therapy on non-surgical treatment of Aggressive Periodontitis: a double-blind split-mouth randomized controlled clinical trial

Moreira, André Luis Gomes
Fonte: Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP Publicador: Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP
Tipo: Dissertação de Mestrado Formato: application/pdf
Publicado em 23/04/2014 PT
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O tratamento da Periodontite Agressiva (PA) representa um desafio para os clínicos, pois não existem protocolos padronizados para um controle eficiente da doença. Este estudo clínico controlado, aleatório e duplo-cego avaliou o efeito de múltiplas aplicações da Terapia Fotodinâmica antimicrobiana (TFDa) como adjuvante ao tratamento periodontal não cirúrgico (TPnc) em pacientes diagnosticados com PA. Utilizando um modelo de estudo do tipo boca dividida, 20 pacientes com diagnóstico clínico de PA foram tratados com TFDa (Grupo Teste) associada à raspagem e alisamento radicular (RAR) ou apenas RAR (Grupo Controle). As aplicações da TFDa foram realizadas em 4 episódios (dias 0, 2, 7 e 14). Todos os pacientes foram acompanhados por 90 dias. Os seguintes parâmetros clínicos, microbiológicos e imunológicos foram analisados: i) profundidade de bolsa à sondagem (PS) e nível de inserção clínico (NCI); ii) contagem de 40 espécies subgengivais em amostras de placa bacteriana (checkerboard DNA-DNA hybridization); iii) avaliação dos níveis de Interleucina (IL)-1β, IL-10 e Fator de Necrose Tumoral alfa (TNF-α) no fluido crevicular gengival (Luminex). Os dados obtidos foram estatisticamente analisados. Na análise de bolsas periodontais profundas (PS inicial ≥ 7mm)...

Participação do PAF-R na fagocitose de células apoptóticas, no fenótipo de macrófagos e na imunossupressão causada por terapia fotodinâmica.; Participation of PAF-R in the phagocytosis of apoptotic cells, in macrophage phenotype and in the immunosuppression caused by photodynamic therapy.

Ferracini, Matheus
Fonte: Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP Publicador: Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP
Tipo: Tese de Doutorado Formato: application/pdf
Publicado em 18/09/2014 PT
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Macrófagos (Mf) produzem PAF e PAF-R e eliminam partículas alteradas via CD36. Uptake de oxLDL requer associação CD36/PAF-R. Avaliamos isto na eferocitose. Bloqueio do PAF-R e de lipid rafts (LR) inibiu eferocitose. Esta induziu associação PAF-R/CD36 e destes com flotilina-1 (marca LR). Eferocitose induziu IL-10 e IL-12p40. Bloqueio do PAF-R inibiu mais IL-10 e inibição da COX-2 teve efeito similar, sugerindo que eferocitose depende da interação PAF-R/CD36 em LR e que isto induz prostanoides e perfil regulador. Mf adquirirem diferentes fenótipos. Estudamos a participação do PAF-R. Bloqueio do PAF-R antes dos estímulos (IFN-g/LPS, IL-4 ou IgG-SRBC/LPS) inibiu marcadores MCP-1, TNF-a, iNOS, receptor manose, arginase-1 e IL-10, mas não IL-12p40, sugerindo que PAF-R modula fenótipo de Mf. PAF e PAF-like são gerados por estressores oxidativos. Ativação do PAF-R induz imunossupressão sistêmica (IS). Mostramos que terapia fotodinâmica (PDT) in vitro gerou ligantes do PAF-R e in vivo inibiu reação de CHS em WT, mas não em PAF-R KO, sugerindo que PDT induz IS via PAF-R.; Macrophages (Mp) produce PAF and PAF-R and scavenge altered particles via CD36. oxLDL uptake requires association CD36/PAF-R. We analyzed that on efferocytosis. PAF-R and lipid rafts (LR) blockage inhibited efferocytosis. Efferocytosis induced association CD36/PAF-R and both with LR marker protein...

Avaliação de mediadores inflamatórios após a terapia fotodinâmica no tratamento de bolsas periodontais residuais de pacientes em manutenção periodontal; Evaluation of inflammatory mediators following photodynamic therapy in the treatment of residual periodontal pockets of periodontal patients in maintenance

Andrade, Priscila Vivas da Cruz
Fonte: Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP Publicador: Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP
Tipo: Dissertação de Mestrado Formato: application/pdf
Publicado em 21/01/2015 PT
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O objetivo deste estudo foi avaliar o impacto da terapia fotodinâmica (PDT) no tratamento de bolsas residuais de pacientes portadores de periodontite crônica em manutenção periodontal, através da avaliação de parâmetros imunológicos, durante 12 meses de acompanhamento. Foi conduzido um estudo prospectivo intervencional com 28 pacientes com periodontite crônica, que foram submetidos ao tratamento periodontal não-cirúrgico e apresentaram ao menos quatro sítios com bolsas residuais para serem submetidos à PDT. Os pacientes foram pareados em gênero, idade e média de profundidade clínica de sondagem (PCS) dos sítios experimentais, e assim sorteados em grupo teste (PDT) ou grupo controle. A intervenção foi feita no início do estudo, aos três, seis e nove meses e a coleta do fluido gengival foi realizada antes da intervenção, uma semana após, três e 12 meses depois. A avaliação imunólogica, realizada por meio do Luminex, quantificou os níveis de dez citocinas: interleucina (IL) IL-1(alfa), IL-1ß, IL-8, IL-1ra, fator de crescimento de fibroblastos (FGF), fator de crescimento vascular endotelial (VEGF), interferon- ? (IFN- Y), fator de necrose tumoral- (alfa) (TNF-(alfa)), IL-4 e IL-10. Em relação a essa análise...

Complexos rutênio-ftalocianinas como fotossensibilizadores para terapia fotodinâmica. Aspectos fotoquímicos e fotobiológicos; Ruthenium-phtalocyanines complexes such as photosensitizer in photodynamic therapy. Photochemical and photobiological aspects

Negri, Laísa Bonafim
Fonte: Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP Publicador: Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP
Tipo: Dissertação de Mestrado Formato: application/pdf
Publicado em 03/03/2015 PT
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Síntese, aspectos estruturais, propriedades fotoquímicas, fotofísicas e fotoindução para avaliação citotóxica in vitro de derivados de [Ru (Pc)] (PC = ftalocianina) são descritos neste trabalho. O desenvolvimento ftalocianinas utilizando anéis macrocíclicos, substituídos e não substituídos simetricamente, coordenados com o centro metálico de rutênio permitiu a obtenção de diferentes compostos. Coordenação de ligantes derivados de óxido nítrico (NO) na posição axial do rutênio (II) permitiu obter [Ru(NO)(Pc)(NO2)], um complexo liberador de NO quando submetido ao processo de redução. Os complexos foram caracterizados por FTIR, UV-Vis, 1H RMN e espectrometria de massas. As propriedades fotoquímicas de complexos como ftalocianinas de rutênio (II) têm sido investigadas por fotólise a laser em diferentes comprimentos de onda. Na irradiação de luz em 660 nm em solução aquosa aerada, observamos o fotoprocesso com a produção de oxigênio singleto. Pode-se observar a relação do rendimento quântico de oxigênio singleto e dos fotossensibilizadores utilizados para sua produção. O oxigênio singleto para [Ru (Pc-R)] segue a ordem [Ru(Pc)]> [Ru (Pc-DCBz)]> [Ru(Pc-DMX)] com DCBz = ácido 4-(3,4-dicianofenoxi) benzóico e DMX = 4...

Terapia fotodinâmica na pele fotoenvelhecida de camundongos hairless: iluminação única e fracionada; Photodynamic Therapy on hairless mice photoaged skin: single and fractionated illumination

Campos, Carolina de Paula
Fonte: Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP Publicador: Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP
Tipo: Dissertação de Mestrado Formato: application/pdf
Publicado em 14/07/2015 PT
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O fotoenvelhecimento é uma condição dérmica decorrente da sobreposição do envelhecimento cronológico e dos efeitos da exposição crônica à radiação ultravioleta (UV) solar. A pele fotodanificada é um local propício para o desenvolvimento de lesões pré-cancerosas que podem evoluir para casos de câncer de pele. Logo, o tratamento dessa condição não é apenas de cunho estético, mas também preventivo. A Terapia Fotodinâmica (TFD) é uma técnica que se baseia na fotoativação de uma molécula fotossensível, que na presença de oxigênio, produz espécies citotóxicas que levam à morte da célula e tecido alvo. Esta técnica tem sido utilizada em estudos clínicos para o tratamento da pele fotoenvelhecida, e tem apresentado bons resultados funcionais e cosméticos. São muitas as variações em parâmetros como fonte de luz, dose e tipo de fotossensibilizador. A TFD fracionada utiliza um tempo de escuro entre frações da dose total e mostra-se mais eficiente que a iluminação em uma única dose, porém seu efeito no tratamento da pele fotoenvelhecida ainda é desconhecido. Neste trabalho, um protocolo de TFD foi desenvolvido para comparar o resultado da terapia com iluminação dose única e fracionada aplicada no fotoenvelhecimento. A avaliação foi através de histologia e espectroscopia de fluorescência e tempo de vida de fluorescência. Camundongos hairless foram fotoenvelhecidos e tratados com luz LED violeta (404 nm) e creme 20% ALA (1h de incubação) com dose única (1 J.cm-2) e fracionada (duas frações de 0...

Avaliação da Terapia Fotodinâmica aplicada com luz intensa pulsada em pele sadia de suínos e diferentes fotossensibilizadores; Evaluation of Photodynamic Therapy using intense pulsed light on porcine healthy skin with different photosensitizers

Requena, Michelle Barreto
Fonte: Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP Publicador: Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP
Tipo: Dissertação de Mestrado Formato: application/pdf
Publicado em 17/07/2015 PT
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A Terapia Fotodinâmica (TFD) caracteriza-se por um conjunto de processos físicos, químicos e biológicos que ocorre após a administração de compostos fotossensibilizantes, que ficam retidos preferencialmente nos tecidos alterados, ao que se segue a irradiação com luz visível, ativando esses fotossensibilizadores (FS) por meio da absorção da luz. Nesta modalidade terapêutica, ocorrem mecanismos de transferência de energia entre o FS e o oxigênio molecular presente nos tecidos, gerando espécies reativas de oxigênio capazes de levar as células à morte. A TFD tem uma de suas principais aplicações no tratamento do câncer de pele, e este trabalho tem por objetivo otimizar tal aplicação utilizando a luz intensa pulsada (LIP) como sistema de irradiação. Na literatura, estudos demonstram a eficiência da aplicação de LIP na área dermatológica e estética na remoção de pelos, tratamento de lesões vasculares, acnes e no fotorejuvenescimento da pele, através de efeitos fotoquímicos e térmicos, mas não há relatos sobre aplicações terapêuticas para o câncer de pele. A aplicação da LIP em TFD leva a diferentes tipos de vantagens destacando-se a possibilidade de diminuição do tempo de tratamento, com consequente redução da dor durante o procedimento. Além disso a possibilidade de aplicação de misturas de FSs que absorvam em diferentes comprimentos de onda...

Fungicidal effect of photodynamic therapy against fluconazole-resistant Candida albicans and Candida glabrata

Dovigo, Livia Nordi; Pavarina, Ana Claudia; de Oliveira Mima, Ewerton Garcia; Giampaolo, Eunice Teresinha; Vergani, Carlos Eduardo; Bagnato, Vanderlei Salvador
Fonte: Wiley-Blackwell Publicador: Wiley-Blackwell
Tipo: Artigo de Revista Científica Formato: 123-130
ENG
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Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP); Processo FAPESP: 05/03226-3; Processo FAPESP: 05/02193-4; Although photodynamic therapy (PDT) has shown great promise for the inactivation of Candida species, its effectiveness against azole-resistant pathogens remains poorly documented. This in vitro study describes the association of Photogem (R) (Photogem, Moscow, Russia) with LED (light emitting diode) light for the photoinactivation of fluconazole-resistant (FR) and American Type Culture Collection (ATCC) strains of Candida albicans and Candida glabrata. Suspensions of each Candida strain were treated with five Photogem (R) concentrations and exposed to four LED light fluences (14, 24, 34 or 50 min of illumination). After incubation (48 h at 37 degrees C), colonies were counted (CFU ml-1). Single-species biofilms were generated on cellulose membrane filters, treated with 25.0 mg l-1 of Photogem (R) and illuminated at 37.5 J cm-2. The biofilms were then disrupted and the viable yeast cells present were determined. Planktonic suspensions of FR strains were effectively killed after PDT. It was observed that the fungicidal effect of PDT was strain-dependent. Significant decreases in biofilm viability were observed for three strains of C. albicans and for two strains of C. glabrata. The results of this investigation demonstrated that although PDT was effective against Candida species...

The effects of rose bengal- and erythrosine-mediated photodynamic therapy on Candida albicans

Borges Pereira Costa, Anna Carolina; Campos Rasteiro, Vanessa Maria; Pereira, Cristiane Aparecida; Rossoni, Rodnei Dennis; Junqueira, Juliana Campos; Cardoso Jorge, Antonio Olavo
Fonte: Wiley-Blackwell Publicador: Wiley-Blackwell
Tipo: Artigo de Revista Científica Formato: 56-63
ENG
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Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES); Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP); The aim of this study was to evaluate the effects of photodynamic therapy (PDT) using rose bengal or erythrosine with light emitting diode (LED) on Candida albicans planktonic cultures and biofilms. Seven C. albicans clinical strains and one standard strain (ATCC 18804) were used. Planktonic cultures and biofilms of each C. albicans strain were submitted to the following experimental conditions: (a) treatment with rose bengal and LED (RB+L+); (b) treatment with erythrosine and LED (E+L+); and (c) control group, without LED irradiation or photosensitiser treatment (P-L-). After irradiation of the planktonic cultures and biofilms, the cultures were seeded onto Sabouraud dextrose agar (37 degrees C at 48 h) for counting of colony-forming units (CFU ml-1) followed by posterior anova and Tukeys test analyses (P < 0.05). The biofilms were analysed using scanning electron microscopy (SEM). The results revealed a significant reduction of planktonic cultures (3.45 log10 and 1.97 log10) and of biofilms (<1 log10) for cultures that were subjected to PDT mediated using either erythrosine or rose bengal, respectively. The SEM data revealed that the PDT was effective in reducing and destroying of C. albicans blastoconidia and hyphae. The results show that erythrosine- and rose bengal-mediated PDT with LED irradiation is effective in treating C. albicans.

Susceptibility of Candida albicans and Candida dubliniensis to erythrosine- and LED-mediated photodynamic therapy

Borges Pereira Costa, Anna Carolina; de Campos Rasteiro, Vanessa Maria; Pereira, Cristiane Aparecida; Hashimoto, Emily Setsuko Halter da Silva; Beltrame Junior, Milton; Junqueira, Juliana Campos; Cardoso Jorge, Antonio Olauo
Fonte: Pergamon-Elsevier B.V. Ltd Publicador: Pergamon-Elsevier B.V. Ltd
Tipo: Artigo de Revista Científica Formato: 1299-1305
ENG
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Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP); Processo FAPESP: 09/52048-1; Processo FAPESP: 10/08936-7; Processo FAPESP: 10/18753-7; Processo FAPESP: 09/12005-1; Processo FAPESP: 10/01988-1; Processo FAPESP: 10/00879-4; The effect of erythrosine- and LED-mediated photodynamic therapy (PDT) on planktonic cultures and biofilms of Candida albicans and Candida dubliniensis was evaluated. Planktonic cultures of standardized suspensions (10(6) cells/mL) of C. albicans and C. dubliniensis were treated with erythrosine concentrations of 0.39-200 mu M and LEDs in a 96-well microtiter plate. Biofilms formed by C. albicans and C. dubliniensis in the bottom of a 96-well microtiter plate were treated with 400 mu M erythrosine and LEDs. After PDT, the biofilms were analysed by scanning electron microscopy (SEM). The antimicrobial effect of PDT against planktonic cultures and biofilms was verified by counting colony-forming units (CFU/mL), and the data were submitted to analysis of variance and the Tukey test (P < 0.05). C. albicans and C. dubliniensis were not detectable after PDT of planktonic cultures with erythrosine concentrations of 3.12 mu M or higher. The CFU/mL values obtained from biofilms were reduced 0.74 log(10) for C. albicans and 0.21 log(10) for C. dubliniensis. SEM revealed a decrease in the quantity of yeasts and hyphae in the biofilm after PDT. In conclusion...

Susceptibility of multispecies biofilm to photodynamic therapy using Photodithazine®

Quishida, Cristiane Campos Costa; Carmello, Juliana Cabrini; Mima, Ewerton Garcia de Oliveira; Bagnato, Vanderlei Salvador; Machado, Ana Lúcia; Pavarina, Ana Cláudia
Fonte: Universidade Estadual Paulista Publicador: Universidade Estadual Paulista
Tipo: Artigo de Revista Científica Formato: 1-10
ENG
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This in vitro study evaluated the effect of photodynamic therapy (PDT) on the multispecies biofilm of Candida albicans, Candida glabrata, and Streptococcus mutans. Standardized fungal and bacterial suspensions were cultivated appropriately for each species and inoculated in 96-well microtiter plates for mix-biofilm formation. After 48 h of incubation, the biofilms were submitted to PDT (P + L+) using Photodithazine® (PDZ) at 100, 150, 175, 200, or 250 mg/mL for 20 min and 37.5 J/cm2 of light-emitting diode (LED) (660 nm). Additional samples were treated only with PDZ (P + L-) or LED (P-L+), or neither (control, P-L-). Afterwards, the biofilms were evaluated by quantification of colonies (CFU/mL), metabolic activity (XTT reduction assay), total biomass (crystal violet staining), and confocal scanning laser microscopy (CSLM). Data were analyzed by one-way ANOVA and Tukey tests (p < 0.05). Compared with the control, PDT promoted a significant reduction in colonies viability of the three species evaluated with 175 and 200 mg/mL of PDZ. PDT also significantly reduced the metabolic activity of the biofilms compared with the control, despite the PDZ concentration. However, no significant difference was found in the total biomass of samples submitted or not to PDT. For all analysis...

Effect of antimicrobial photodynamic therapy on periodontally infected tooth sockets in rats

Theodoro, Letícia Helena; Pires, Juliana Rico; Fernandes, Leandro Araújo; Gualberto Júnior, Erivan Clementino; Longo, Mariéllen; Almeida, Juliano Milanezi de; Garcia, Valdir Gouveia
Fonte: Universidade Estadual Paulista Publicador: Universidade Estadual Paulista
Tipo: Artigo de Revista Científica Formato: 1-7
ENG
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The aim of the present study was to evaluate the antimicrobial effect of antimicrobial photodynamic therapy (aPDT) in alveolar treatment of areas with induced periodontitis. Thirty male Wistar rats were subjected to ligature-induced periodontal disease (PD) in the first left inferior molars, while the right side molars did not receive ligatures. After 7 days of PD evolution, ligatures were removed from the left side, and the first left and right mandibular molars were extracted. Afterwards, animals were divided into groups according to the following treatments: control (C)-no treatment; mechanical debridement (MD)-mechanical debridement and irrigation with saline solution; and aPDT-mechanical debridement, irrigation with toluidine blue O (TBO), and 1 min of laser irradiation (GaAlAs, 660 nm, 30 mW, 32 J/cm2, 60 s). Ligatures were removed and samples of the alveolar content after extraction and after each treatment were collected for microbial processing by real-time polymerase chain reaction with specific primers for Aggregatibacter actinomycetemcomitans, Porphyromonas gingivalis, and Treponema denticola. Data were submitted to statistical analysis by multiple comparison tests (McNemar test; p < 0.05). T. denticola was not found in the collected samples. A. actinomycetemcomitans and P. gingivalis were found in ligature samples. Tooth socket samples without periodontitis induction presented lesser microbial charge than samples with induced periodontitis (p < 0.05). aPDT significantly reduced A. actinomycetemcomitans levels on the left side (p < 0.05). It was concluded that aPDT was an effective antimicrobial treatment for tooth sockets in areas affected by induced periodontitis. © 2013 Springer-Verlag London.

The influence of photodynamic therapy parameters on the inactivation of Candida spp: in vitro and in vivo studies

Alves, F.; Mima, E. G.; Dovigo, L. N.; Bagnato, V. S.; Jorge, J. H.; Souza Costa, C. A. de; Pavarina, A. C.
Fonte: Iop Publishing Ltd Publicador: Iop Publishing Ltd
Tipo: Artigo de Revista Científica Formato: 8
ENG
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Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq); The influence of parameters of photodynamic therapy (PDT), such as pre-irradiation time (PIT), on the inactivation of Candida spp. was assessed in vitro and in vivo. Suspensions of Candida albicans, Candida tropicalis, Candida krusei and Candida glabrata were treated with Photogem (R), incubated for 5, 10 or 15 min and illuminated with a blue LED light. Colonies were cultivated and log values of CFU ml(-1) were analyzed by ANOVA and Kruskall-Wallis test. For in vivo evaluation, immunosuppressed mice were inoculated with C. albicans. PDT was performed on the dorsum of the tongue by topical administration of Photogem (R) and illumination after 5, 10 or 15 min. C. albicans was recovered from the tongue and the number of CFU ml(-1) was analyzed by ANOVA and Tukey test. Animals were killed and the tongues were surgically removed for histological analysis. Susceptibility of Candida spp. suspensions to PDT was in decreasing order: C. albicans = C. tropicalis < C. krusei < C. glabrata. No significant difference was observed among the different PIT (p > 0.05), both in vivo and in vitro. A significant reduction (p < 0.05) of log. CFU ml(-1)) of C. albicans from tongues of mice was observed with no adverse effects in the tissue. PDT was effective to inactivate in vitro Candida spp. and for reduction of C. albicans in vivo...

Safety assessment of oral photodynamic therapy in rats

Fontana, Carla R.; Lerman, Mark A.; Patel, Niraj; Grecco, Clovis; Souza Costa, Carlos A. de; Amiji, Mansoor M.; Bagnato, Vanderlei S.; Soukos, Nikolaos S.
Fonte: Springer Publicador: Springer
Tipo: Artigo de Revista Científica Formato: 479-486
ENG
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Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP); Photodynamic therapy (PDT) is based on the synergism of a photosensitive drug (a photosensitizer) and visible light to destroy target cells (e.g., malignant, premalignant, or bacterial cells). The aim of this study was to investigate the response of normal rat tongue mucosa to PDT following the topical application of hematoporphyrin derivative (PhotogemA (R)), PhotodithazineA (R), methylene blue (MB), and poly(lactic-co-glycolic acid) (PLGA) nanoparticles loaded with MB. One hundred and thirty three rats were randomly divided in various groups: the PDT groups were treated with the photosensitizers for 10 min followed by exposure to red light. Those in control groups received neither photosensitizer nor light, and they were subjected to light exposure alone or to photosensitizer alone. Fluorescent signals were obtained from tongue tissue immediately after the topical application of photosensitizers and 24 h following PDT. Histological changes were evaluated at baseline and at 1, 3, 7, and 15 days post-PDT treatment. Fluorescence was detected immediately after the application of the photosensitizers, but not 24 h following PDT. Histology revealed intact mucosa in all experimental groups at all evaluation time points. The results suggest that there is a therapeutic window where PDT with PhotogemA (R)...

Biofilms of Candida albicans serotypes A and B differ in their sensitivity to photodynamic therapy

Rossoni, Rodnei Dennis; Barbosa, Junia Oliveira; Oliveira, Felipe Eduardo de; Oliveira, Luciane Dias de; Cardoso Jorge, Antonio Olavo; Junqueira, Juliana Campos
Fonte: Springer Publicador: Springer
Tipo: Artigo de Revista Científica Formato: 1679-1684
ENG
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Candida albicans is classified into different serotypes according to cell wall mannan composition and cell surface hydrophobicity. Since the effectiveness of photodynamic therapy (PDT) depends on the cell wall structure of microorganisms, the objective of this study was to compare the sensitivity of in vitro biofilms of C. albicans serotypes A and B to antimicrobial PDT. Reference strains of C. albicans serotype A (ATCC 36801) and serotype B (ATCC 36802) were used for the assays. A gallium-aluminum-arsenide laser (660 nm) was used as the light source and methylene blue (300 mu M) as the photosensitizer. After biofilm formation on the bottom of a 96-well microplate for 48 h, each Candida strain was submitted to assays: PDT consisting of laser and photosensitizer application (L + P+), laser application alone (L + P-), photosensitizer application alone (L-P+), and application of saline as control (L-P-). After treatment, biofilm cells were scraped off and transferred to tubes containing PBS. The content of the tubes was homogenized, diluted, and seeded onto Sabouraud agar plates to determine the number of colony-forming units (CFU/mL). The results were compared by analysis of variance and Tukey test (p < 0.05). The two strains studied were sensitive to PDT (L + P+)...

Photodynamic therapy in root canals contaminated with Enterococcus faecalis using curcumin as photosensitizer

Frota, Matheus Franco da; Tanomaru Filho, Mario; Bagnato, Vanderlei Salvador; Espir, Camila Galetti; Berbert, Fabio Luis Camargo Villela; Tanomaru, Juliane Maria Guerreiro
Fonte: Universidade Estadual Paulista Publicador: Universidade Estadual Paulista
Tipo: Artigo de Revista Científica Formato: 1-6
ENG
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The aim of the study was to evaluate the photodynamic therapy (PDT) effect on root canals contaminated with Enterococcus faecalis using a light emitting diode (LED) light and a curcumin solution (CUR) as photosensitizer (PS). Eighty root canals from uniradicular human teeth were prepared with Protaper Universal rotary system and contaminated with E. faecalis for 21 days. They were divided as: GIa-PDT (CUR, pre-irradiation for 5 + 5 min of irradiation); GIb-PDT (CUR, pre-irradiation for 5 + 10 min of irradiation); GIIa-(CUR, pre-irradiation for 5 + 5 min without irradiation); GIIb-(CUR pre-irradiation for 5 + 10 min of irradiation); GIIIa-(physiological solution and irradiation for 5 min); and GIIIb-(physiological solution and irradiation for 10 min); positive and negative control groups. Collections from root canals were made at time intervals of 21 days after contamination, immediately after treatment, and 7 days after treatment, and submitted to colony forming units per milliter (CFU mL-1) counts. The data were submitted to ANOVA and Tukey multiple comparison tests, at a level of significance of 5 %. In the immediate post-treatment collection, group GIa showed greater bacterial reduction in comparison with GIIa, GIIb...

Preparação, caracterização e avaliação de nanosferas de PLGA (50:50) contendo In(lll)-Meso-tetrafenilporfirina para aplicação em terapia fotodinamica; Preparation, chracterization and evaluation of PLGA 50:50 nanospheres loaded with In(lll)-meso-tetraphenylporphyrin for use in photodynamic therapy

Andre Romero da Silva
Fonte: Biblioteca Digital da Unicamp Publicador: Biblioteca Digital da Unicamp
Tipo: Tese de Doutorado Formato: application/pdf
Publicado em 02/03/2007 PT
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O cloreto de In(III)-meso-tetrafenilporfirina (InTPP) foi encapsulado em nanopartículas de poli(lactídio-co-glicolídio) (PLGA) 50:50, preparadas através do método de emulsão e evaporação. Foram obtidas nanopartículas com tamanho inferior a 200 nm e com uma distribuição homogênea. A velocidade de agitação e a porcentagem de etanol na fase aquosa foram os fatores que mais influenciaram nas diferentes propriedades estudadas (tamanho, potencial zeta, eficiência de encapsulação e recuperação da partícula, e porcentagem residual de emulsificante e de solvente orgânico utilizados). Foi desenvolvido um novo método de monitoramento da liberação do fármaco encapsulado sem separar as partículas do meio, usando um espectrofotômetro associado ao acessório de refletância difusa. O InTPP foi liberado das nanopartículas por um processo bifásico, caracterizado por uma rápida liberação inicial seguido por uma mais lenta. Utilizando modelos matemáticos concluiu-se que a liberação do InTPP ocorre por difusão. A viabilidade de células cancerígenas de próstata (LNCaP) foi reduzida para 40,8 e 1,7% na presença de 1,8 mmol/L de InTPP livre ou encapsulado, respectivamente, após 120 minutos de irradiação. Análises de microscopia confocal mostraram que uma maior quantidade de InTPP encapsulado foi internalizado na célula se comparado ao fármaco livre o que justifica a melhor eficiência do fotossensibilizador encapsulado em reduzir a viabilidade das células LNCaP. Em ambas as situações o InTPP livre ou encapsulado foi localizado na região perinuclear da célula. Experimentos de ressonância paramagnética eletrônica confirmaram a participação do oxigênio singlete no processo fotocitotóxico...

Possible in vivo mechanisms involved in photodynamic therapy using tetrapyrrolic macrocycles

Filip,A.G.; Clichici,S.; Daicoviciu,D.; Ion,R.M.; Tatomir,C.; Rogojan,L.; Opris,I.; Mocan,T.; Olteanu,D.; Muresan,A.
Fonte: Associação Brasileira de Divulgação Científica Publicador: Associação Brasileira de Divulgação Científica
Tipo: Artigo de Revista Científica Formato: text/html
Publicado em 01/01/2011 EN
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Photodynamic therapy (PDT) mediated by oxidative stress causes direct tumor cell damage as well as microvascular injury. To improve this treatment new photosensitizers are being synthesized and tested. We evaluated the effects of PDT with 5,10,15,20-tetrakis(4-methoxyphenyl)-porphyrin (TMPP) and its zinc complex (ZnTMPP) on tumor levels of malondialdehyde (MDA), reduced glutathione (GSH) and cytokines, and on the activity of caspase-3 and metalloproteases (MMP-2 and -9) and attempted to correlate them with the histological alterations of tumors in 3-month-old male Wistar rats, 180 ± 20 g, bearing Walker 256 carcinosarcoma. Rats were randomly divided into five groups: group 1, ZnTMPP+irradiation (IR) 10 mg/kg body weight; group 2, TMPP+IR 10 mg/kg body weight; group 3, 5-aminolevulinic acid (5-ALA+IR) 250 mg/kg body weight; group 4, control, no treatment; group 5, only IR. The tumors were irradiated for 15 min with red light (100 J/cm², 10 kHz, 685 nm) 24 h after drug administration. Tumor tissue levels of MDA (1.1 ± 0.7 in ZnTMPP vs 0.1 ± 0.04 nmol/mg protein in control) and TNF-α (43.5 ± 31.2 in ZnTMPP vs 17.3 ± 1.2 pg/mg protein in control) were significantly higher in treated tumors than in controls. Higher caspase-3 activity (1.9 ± 0.9 in TMPP vs 1.1 ± 0.6 OD/mg protein in control) as well as the activation of MMP-2 (P < 0.05) were also observed in tumors. These parameters were correlated (Spearman correlation...

The inhibitory effect of photodynamic therapy and of an anti-VCAM-1 monoclonal antibody on the in vivo growth of C6 glioma xenografts

Zhan,Qi; Yue,Wu; Shaoshan,Hu
Fonte: Associação Brasileira de Divulgação Científica Publicador: Associação Brasileira de Divulgação Científica
Tipo: Artigo de Revista Científica Formato: text/html
Publicado em 01/05/2011 EN
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We investigated the effect of photodynamic therapy (PDT) and of an anti-vascular cell adhesion molecule-1 (VCAM-1) monoclonal antibody on the in vivo growth of C6 glioma. Seven days after inoculation with C6 cells, adult male Wistar rats weighing 280-300 g with MRI-confirmed glioma were randomly assigned to 4 groups (N = 15 per group): PDT + VCAM-1 antibody group; PDT group; VCAM-1 antibody group; control group. Eight days after inoculation, hematoporphyrin monomethyl ether (HMME) was administered as a photosensitizer and PDT was performed at 630 nm (illumination intensity: 360 J/cm²) for 10 min. VCAM-1 antibody (50 µg/mL) was then administered (0.5 mL) through the tail vein every other day from day 8 to day 16. At day 21, 5 rats in each group were sacrificed and cancers were harvested for immunohistochemistry and Western blot assay for the detection of VCAM-1, and TUNEL assay was used to detect apoptosis. Survival and tumor volume were recorded in the remaining 10 rats in each group. In the PDT group, tumor growth was significantly suppressed (67.2%) and survival prolonged (89.3%), accompanied by an increase in apoptosis (369.5%), when compared to control. Furthermore, these changes were more pronounced in the PDT + VCAM-1 antibody group. After PDT...

Manual and Rotary Instrumentation Ability to Reduce Enterococcus faecalis Associated with Photodynamic Therapy in Deciduous Molars

Pinheiro,Sérgio Luiz; Silva,Josianne Neres da; Gonçalves,Rafael Orro; Villalpando,Karina Teixeira
Fonte: Fundação Odontológica de Ribeirão Preto Publicador: Fundação Odontológica de Ribeirão Preto
Tipo: Artigo de Revista Científica Formato: text/html
Publicado em 01/12/2014 EN
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This aim of this study was to assess the ability of manual or rotary instrumentation associated with photodynamic therapy (PDT) to reduce Enterococcus faecalis using three combinations of light/photosensitizers: toluidine blue O/laser, fuchsin/halogen light and fuchsin/LED. Twenty deciduous molars were selected and contaminated with Enterococcus faecalis (McFarland 0.5 scale). Working length determination was performed by visual method. The teeth were randomly divided into two groups: G1 (n=10): manual instrumentation (Kerr-type files) and G2 (n=10): rotary instrumentation (ProTaper system). The bacteria were collected three times using sterile paper cones compatible with the anatomic diameter of the root canal for 30 s before and after instrumentation and after PDT. The samples were diluted in peptone water, seeded on blood agar plates and incubated in an oven at 37 °C for colony-forming units counting. The decrease of E. faecalis counts after instrumentation and after PDT was compared using the Wilcoxon test, t-test and Kruskal Wallis test. A significant reduction of E. faecalis occurred after manual and rotary instrumentation and after PDT using the three combinations of light/photosensitizer (p<0.05). It may be concluded that both rotary and manual instrumentation reduced E. faecalis. Fuchsin with halogen light or LED irradiation and toluidine blue O with laser irradiation can be used to reduce E. faecalis in root canals of primary molars. PDT can be used as an adjuvant to conventional endodontic treatment.