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Biologia molecular como ferramenta para o diagnóstico de fungemias: padronização de protocolos e comparação com métodos convencionais

Siqueira, João Paulo Zen
Fonte: Universidade Estadual Paulista (UNESP) Publicador: Universidade Estadual Paulista (UNESP)
Tipo: Dissertação de Mestrado Formato: 65 f. : il.
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46.02%
Pós-graduação em Microbiologia - IBILCE; As Infecções relacionadas à Assistência à Saúde (IRAS) estão entre as principais causas de morbidade e de mortalidade em ambiente hospitalar. Neste panorama, destacam-se as fungemias, que são estabelecidas quando há um comprometimento da resposta da resposta imune do hospedeiro. Os avanços médicos nas últimas duas décadas melhoraram a sobrevida dos pacientes críticos, o que levou a um aumento de infecções em UTI. O método diagnóstico atualmente utilizado para este tipo de infecção (hemocultura) é lento e apresenta baixa sensibilidade. Demais alternativas de diagnóstico rápido são essenciais por permitir a adoção da terapia antimicrobiana correta e diminuir o tempo de internação, evitando gastos e sobrecarga ao sistema de saúde. Deste modo, métodos moleculares são promissores por serem mais rápidos, precisos e sensíveis. Sendo assim, o objetivo geral deste estudo foi avaliar comparativamente técnicas laboratoriais diagnósticas para fungemia – método molecular (nested PCR) versus cultura – e associar aos aspectos clínicos dos pacientes, tempo de realização e custos. A população foi composta por 89 pacientes, sendo 67 provenientes de UTI Geral e 22 de UTI Neonatal...

Rastreamento de Listeria monocytogenes em industrias processadoras de queijo frescal tipo latino, nos Estados Unidos da America, empregando a subtipagem molecular .; Tracking of would listeria monocytogenes in processing industries of frescal cheese Latin type, in the United States of America, using the molecular subtipagem.

Dirce Yorika Kabuki
Fonte: Biblioteca Digital da Unicamp Publicador: Biblioteca Digital da Unicamp
Tipo: Tese de Doutorado Formato: application/pdf
Publicado em 04/08/2004 PT
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Os queijos frescais estilo Hispânico são alimentos de alto risco à contaminação por L. monocytogenes e já foram associados à pelo menos dois surtos de listeriose nos Estados Unidos da América. O conhecimento maior das fontes de contaminação por L. monocytogenes no processamento de queijos frescos tipo Hispânico é crítico para permitir o desenvolvimento de estratégias mais eficazes para o controle deste perigo. Neste trabalho, foi realizado um diagnóstico da contaminação por L. monocytogenes em três indústrias processadoras de queijos frescais tipo Hispânico, nos Estados Unidos. Um total de 246 amostras ambientais foi coletado e analisado para L. monocytogenes utilizando-se o método preconizado pela "Food and Drug Administration" (FDA) e o método "Biosynth L. monocytogenes detection system" (LMDS). As amostras de queijo, produzidos nestas indústrias (n=111), foram analisadas utilizando-se o método da FDA, modificado pela inclusão dos meios de cultura "L. monocytogenes plating medium" (LMPM) e "Listeria monocytogenes confirmatory plating medium" (LMCM) utilizados no método LMDS. L. monocytogenes foi detectada em 6,3% dos queijos e 11,0% das amostras ambientais. Dentre as amostras ambientais, aquelas obtidas de caixa vazada de plástico...

Epidemiologia de matalo-ß-lactamases em isolados clínicos de Pseudomonas aeruginosa resistentes ao imipenemo

Pena, Aldina Maria Rodrigues
Fonte: Universidade de Aveiro Publicador: Universidade de Aveiro
Tipo: Dissertação de Mestrado
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45.91%
Pseudomonas aeruginosa é um patogénico humano oportunista responsável por infecções nosocomiais, particularmente em doentes imunocomprometidos. Os carbapenemos são agentes antimicrobianos frequentemente utilizados no tratamento de infecções provocadas por P. aeruginosa. Contudo, nesta espécie, tem-se verificado um aumento de estirpes resistentes a estes antibióticos. A produção de metalo-β-lactamases constitui um dos mecanismos de resistência emergente aos carbapenemos. As metalo-β-lactamases caracterizam-se pela eficiente capacidade de hidrolisar a maioria dos β-lactâmicos, especialmente os carbapenemos. A observação de isolados produtores das metalo-β-lactamases IMP e VIM tem aumentado por todo o mundo. A metalo-β-lactamase VIM é a mais frequente na Europa mediterrânica. Recentemente em P. aeruginosa foram descritas as metalo-β- lactamases SPM-1 no Brasil e GIM na Alemanha. Neste trabalho foram estudados 136 isolados clínicos resistentes ao imipenemo seleccionados a partir de 773 isolados de P. aeruginosa, colhidos durante dois anos (Abril de 2003 e Abril de 2005) no Centro Hospitalar de Coimbra. As susceptibilidades destes isolados resistentes ao imipenemo a outros antibióticos foram: meropenemo 20,3%, ceftazidima 56...

Caracterização físico-química e ecológica (diatomáceas) das linhas de água de Aveiro

Oliveira, Nuno Coimbra Simões de
Fonte: Universidade de Aveiro Publicador: Universidade de Aveiro
Tipo: Dissertação de Mestrado
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Com o intuito de caracterizar, em termos de qualidade da água, algumas formações aquáticas do concelho de Aveiro, destinadas a serem aproveitadas para fins recreativos, efectuaram-se 4 campanhas de amostragem, uma por estação do ano, em 10 locais de amostragem previamente seleccionados. As amostras de água foram caracterizadas do ponto de vista físico-químico mediante a determinação de pH, condutividade, oxigénio dissolvido, carência química de oxigénio, carência bioquímica de oxigénio, nitratos, nitritos, azoto amoniacal e fosfatos e os valores obtidos comparados com a legislação vigente. Os locais mais contaminados do ponto vista orgânico e de nutrientes foram os locais 1 – Ribeira do Sr. das Barrocas; 2 – Ribeira da Forca; 5 – Vala do Fontão e o local 6 – Ponte do Pano. As comunidades de diatomáceas foram estudadas e aplicados alguns índices biológicos (Índice de Polluosensibildade Específica – IPS; Índice Biológico das Diatomáceas – IBD e o Índice Trófico Diatómico – TDI) para caracterizar do ponto de vista biológico os mesmos locais de amostragem. O IPS foi o que apresentou, de uma forma geral, os resultados mais coerentes com a caracterização físico–química das águas. Do conjunto das dez estações sobressaiu um grupo pela sua má qualidade praticamente constante (1...

Captação de ferro por amastigotas de Leishmania infantum

Santarém, Nuno Pedro Moreira
Fonte: Universidade de Aveiro Publicador: Universidade de Aveiro
Tipo: Dissertação de Mestrado
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45.95%
O ferro é um elemento essencial para quase todos os organismos, a Leishmania não é excepção. Pouco é conhecido sobre o metabolismo do ferro em Leishmania, especialmente no seu estadío intracelular, o amastigota. Por isso foram estudadas quais as fontes de ferro utilizáveis pela forma amastigota. Usando um meio pobre em ferro foi demonstrado que amastigotas axénicos de Leishmania infantum são capazes de adquirir ferro proveniente de diferentes fontes como a hemoglobina, a hemina, ferro associado a quelantes de baixo peso molecular e ferro iónico. Pelo contrário a ferritina, a lactoferrina e a transferrina não permitiram o crescimento parasitário. Foi também iniciado o estudo dos mecanismos de captação de ferro associados ás diferentes fontes utilizáveis. Resultados preliminares sugerem a aquisição de ferro a partir da hemina e da hemoglobina mediante receptores específicos ou então, no caso do ferro iónico e do ferro associado a nitrilotioacetato, mediante a acção de reductases ABSTRACT: Iron is an essential element for all living systems. Leishmania is no exception. Litle is known about iron metabolism in Leishmania, especially in the mammalian stage (the amastigote). For this reason we have started looking at the process of iron aquisition in amastigotes. Using an iron poor media we demonstrated that Leishmania infantum axenic amastigotes are able to acquire iron from different iron sources like haemogoblin...

Detecção de DNA microbiano em amostras clínicas e culturas bacterianas

Mendes, Ana Constança Pinheiro
Fonte: Universidade de Aveiro Publicador: Universidade de Aveiro
Tipo: Dissertação de Mestrado
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46.1%
As infecções do sistema circulatório constituem um campo prioritário de intervenção, com cerca de 200000 casos de bacterémia e fungémia anualmente nos EUA, com taxas de mortalidade associadas entre 20 e 50%. Os métodos convencionais de detecção de microrganismos a partir do sangue (hemocultura) atingiram um nível de desenvolvimento difícil de melhorar. No entanto, continua a ser desejável conseguir resultados com maior sensibilidade, capazes de contornar o efeito inibitório da antibioterapia empírica muitas vezes instituída previamente à colheita, em tempo clinicamente útil. Foi testado um sistema comercial de extracção, amplificação e detecção por PCR em tempo real, SeptiFast Test, (Roche), capaz de identificar 25 espécies de bactérias e fungos directamente a partir de amostras de sangue, em cerca de 6 horas. Os resultados obtidos, quando comparados com a evidência de infecção, mostraram sensibilidade semelhante à da hemocultura (67 e 68% respectivamente) e igual valor preditivo negativo (88%), no entanto o VPN do SeptiFast é limitado aos 25 microrganismos contemplados no teste molecular. A aplicação prática do teste beneficiaria da automatização do protocolo de extracção de ácidos nucleicos...

Selecção e caracterização de mini-anticorpos recombinantes anti-ciprofloxacina

Gomes, Francisco Bruno Moreira Brás
Fonte: Universidade de Aveiro Publicador: Universidade de Aveiro
Tipo: Dissertação de Mestrado
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Este trabalho teve como objectivo central a obtenção de mini-anticorpos recombinantes com especificidade para o antibiótico ciprofloxacina (CPFX). A utilização em saúde humana, animal e vegetal deste antibiótico tornou-o, à semelhança de outros, um problema de contaminação ambiental. Actualmente, o doseamento de CPFX em amostras é feito, na maioria das vezes, por cromatografia líquida de alta resolução (HPLC), o que é um método bastante moroso. Assim, há grande interesse em desenvolver métodos alternativos, rápidos e sensíveis para detecção daquele composto. Imunoensaios com recurso a anticorpos recombinantes, ou fragmentos de anticorpos, é uma via interessante e esta constitui o objectivo último desta investigação. Para tal, neste trabalho escolheu-se efectuar uma selecção numa biblioteca de fagos (Griffin.1) que expressam mini-anticorpos de cadeia única (scFv`s) à sua superfície (denominados phAbs), para isolar alguns com afinidade para CPFX, através da técnica de phage display. O processo exigiu, num primeiro passo, a imobilização da CPFX num suporte sólido, tendo-se optado por esferas magnéticas. Efectuou-se a ligação covalente entre o grupo carboxílico da CPFX e os grupos amina à superfície das esferas por reacção com carbodiimida. Conseguiu-se uma aparente saturação dos grupos amina com CPFX. Para quantificação de CPFX nas soluções...

Detecção molecular de Pneumocystis jirovecii no doente imunodeprimido

Campos, Carla Manuela Moutinho Silva
Fonte: Universidade de Aveiro Publicador: Universidade de Aveiro
Tipo: Dissertação de Mestrado
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46.08%
O diagnóstico rápido das doenças infecciosas, particularmente daquelas que representam um problema de saúde pública, apresenta-se como um dos maiores desafios para a microbiologia. Uma das doenças que mais tem merecido a atenção dos técnicos é a pneumocistose, provocada por um microorganismo oportunista particularmente activo na população imunodeprimida e que se encontra distribuído por todos os continentes e climas: o Pneumocystis jirovecii, anteriormente conhecido como Pneumocystis carinii. Identificado há quase cem anos por Carlos Chagas, o Pneumocystis jirovecii sempre revelou características atípicas, tendo sido, durante muitos anos classificado como um protozoário, até que, em 1988, foi reclassificado como fungo. Contudo, muito há ainda por descobrir quanto à sua natureza e à forma como é adquirido e transmitido. As metodologias que são normalmente utilizadas na rotina laboratorial para a detecção de Pneumocystis jirovecii requerem técnicas de coloração não específicas, já que, até hoje, tem sido impossível obter o crescimento e isolamento in vitro deste microorganismo. Apesar de estas técnicas serem ainda uma referência, começam a ser aplicados métodos emergentes, como é o caso dos métodos moleculares...

Caracterização genética de isolados axénicos de Giardia lamblia

Oliveira, Ana Isabel de Freitas Tavares de
Fonte: Universidade de Aveiro Publicador: Universidade de Aveiro
Tipo: Dissertação de Mestrado
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As parasitoses intestinais continuam a constituir um grave problema de saúde pública, a nível mundial. Giardia lamblia, também denominada G. duodenalis ou G. intestinalis é um protozoário frequentemente responsável por patologias entéricas, representando, nos seres humanos, o principal agente causal de gastroenterites parasitárias. A giardiose é, assim, tida como a mais frequente das parasitoses de índole protozoária. Tendo em conta a escassez de trabalhos, em Portugal, sobre esta patologia, com este trabalho pretende-se contribuir para o enriquecimento do conhecimento nesta área. Assim, efectuou-se um estudo epidemiológico, nas cidades do Porto e Viseu, no qual foram pesquisados diversos parasitas, entre os quais, G. lamblia. A inexistência de isolados levou à caracterização molecular, por PCR – RFLP, de outros, criopreservados, o que conduziu à optimização de um protocolo que poderá ser usado rotineiramente no Laboratório de Investigação.; Parasitic diseases continue, knowadays, to be a major concern and health problem, all over the world. The protozoa Giardia lamblia (also kwoned as G. duodenalis or G. intestinalis) is responsible, in humans, for the most of parasitic gastroenteritis. Giardiasis is, therefore...

Caracterização físico-química e microbiológica de solos e águas da Ilha de Porto Santo

Moreira, Helena Maria Gomes
Fonte: Universidade de Aveiro Publicador: Universidade de Aveiro
Tipo: Dissertação de Mestrado
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46.01%
A Ilha de Porto Santo é a segunda maior ilha do arquipélago da Madeira (Portugal) e viu o seu coberto vegetal, nos últimos séculos, alterado de forma praticamente completa, devido a actividades antrópicas. Esta alteração do coberto vegetal, aliada a uma geologia dominada por solos sedimentares e arenosos e a condições meteorológicas relativamente pouco pluviosas, traduzse, hoje, numa acentuada desertificação e erosão que urge combater. Foi efectuado um estudo preliminar das características físico-químicas e microbiológicas de amostras de solos, principalmente daqueles que estão, ou poderão vir, a ser alvo de reflorestação, e amostras de águas de alguns recursos hídricos da Ilha. Este trabalho foi realizado no âmbito de um projecto mais vasto de investigação intitulado "Reflorestação da Ilha de Porto Santo usando plantas autóctones, regeneradas in vitro e adaptadas a stress hídrico" (Projecto REI), que envolveu ainda outras componentes de estudo agroflorestais. Para além da caracterização de solos e águas, foram também efectuadas análises ao conteúdo elemental, hídrico e orgânico de amostras vegetais, de porte arbóreo, presentes nas zonas de recolha das amostras de águas. No que diz respeito as amostras de solo recolhidas...

Caracterização fenotípica e genotípica de estirpes de fungos fitopatogénicos do género Phaeoacremonium

Alves, Artur Jorge da Costa Peixoto
Fonte: Universidade de Aveiro Publicador: Universidade de Aveiro
Tipo: Dissertação de Mestrado
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O síndroma da esca é uma das doenças mais destrutivas da videira (Vitis vinifera L.), estando disseminado pela grande maioria dos países onde tradicionalmente se cultiva a vinha, tendo sido já identificada em diversas regiões vitivinícolas de Portugal. Pensa-se que esta doença resulta da acção de diversos fungos actuando conjuntamente ou em sucessão. De entre estes, os mais frequentes são fungos mitospóricos do género Phaeoacremonium. Neste trabalho foram analisadas 14 estirpes deste género isoladas de videiras afectadas com esca e pertencentes às espécies P. chlamydosporum, P. aleophilum, P. angustius e P. viticola. Foram realizados estudos sobre alguns aspectos fisiológicos destas estirpes, nomeadamente a produção de enzimas extracelulares e sensibilidade a fungicidas. Todas as estirpes revelaram produzir actividade de protease, lipase, amilase, celulase, xilanase e pectinase. Adicionalmente as estirpes de P. aleophilum, P. angustius e P. viticola produzem lacase e pectato liase. Todas as estirpes revelaram também maior sensibilidade aos fungicidas tiabendazol e carbendazima, do que ao zirame e ao arsenito de sódio. Neste estudo foram ainda aplicados métodos moleculares no intuito de estabelecer metodologias que permitam uma identificação/classificação rápida e fidedigna de novos isolados...

Caracterização de beta-lactamases em Serratia fonticola

Henriques, Isabel
Fonte: Universidade de Aveiro Publicador: Universidade de Aveiro
Tipo: Dissertação de Mestrado
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A estirpe Serratia fonticola UTAD54 foi isolada no âmbito de um estudo realizado com o objectivo de analisar a presença e disseminação de genes de resistência a antibióticos, em bactérias de águas de consumo. Verificou-se que esta estirpe é resistente a diversos antibióticos do grupo dos beta-lactâmicos, nomeadamente às penicilinas e aos carbapenemos. No âmbito deste estudo foi detectada a produção de uma metalo-beta-lactamase denominada SfhI, responsável pelo fenótipo de resistência aos carbapenemos (Saavedra, 2000). O objectivo principal do presente trabalho é caracterizar os mecanismos responsáveis pela resistência às penicilinas na estirpe S. fonticola UTAD54. Um clone resistente à carbenicilina foi seleccionado a partir de uma biblioteca genómica desta estirpe. O DNA plasmídico recombinante foi extraído e analisado, e a sequência nucleotídica de um fragmento com cerca de 1,7 Kb foi determinada. A análise desta sequência permitiu detectar a presença de uma ORF constituída por 927 nucleótidos que codifica um péptido com cerca de 30,7 KDa. O valor do ponto isoeléctrico desta proteína foi estimado em 7,95. A sequência de aminoácidos deduzida revelou um elevado grau de homologia com as sequências das 5 carbapenemases de classe A conhecidas...

Screening of class 1 integrons in clinical isolates of Gram-negative bacteria; Pesquisa de integrões classe 1 em isolados clínicos de Gram-negativo

Santos, Cátia Raquel Talhas
Fonte: Universidade de Aveiro Publicador: Universidade de Aveiro
Tipo: Dissertação de Mestrado
ENG
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45.98%
Actualmente, é cada vez mais frequente a associação de bactérias oportunistas e comensais resistentes a antibióticos com infecções nosocomiais. Este problema clínico tornou-se preocupante e deve-se ao uso indiscriminado de antibióticos. Perante esta pressão selectiva, as bactérias desenvolvem diferentes mecanismos de resistência a estes compostos. A presença de estruturas capazes de transportar genes de resistência, designadas por integrões, que contribuem para a disseminação destes genes bem como a sua associação com o perfil de resistência de bactérias constitui o objectivo do presente trabalho. Assim, foram recolhidas amostras de superfícies das instalações sanitárias, do serviço de Medicina II, do Hospital Infante D. Pedro, Aveiro. Após o isolamento das bactérias em meio selectivo para Gramnegativas (MacKonkey), todos os isolados foram sujeitos a tipagem molecular por BOX-PCR. O perfil de bandas obtido após electroforese foi analisado com o programa GelCompar II software (Applied Maths, Kortrijk, Belgium), permitindo distinguir diferentes grupos clonais. De cada grupo clonal foi seleccionado um isolado para os estudos posteriores, resultando num total de 45 isolados distintos. A pesquisa de integrões classe 1 iniciou-se por um “screening” para o gene da integrase. Nos 25 isolados positivos para este gene...

Pesquisa e caracterização de integrões em bactérias isoladas de ambientes naturais e hospitalares

Mondego, Ana Paula Gaspar
Fonte: Universidade de Aveiro Publicador: Universidade de Aveiro
Tipo: Dissertação de Mestrado
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45.95%
A resistência bacteriana a antibióticos constitui um motivo de preocupação crescente e está frequentemente associada a elementos genómicos móveis, em que se incluem os integróes, podendo, por isso, ser transmitida entre estirpes. Neste trabalho pesquisaram-se integróes em estirpes bacterianas de Pseudomonas aeruginosa e de Brevibacterium spp. resistentes a antibióticos isoladas de diferentes fontes e procedeu-se a caracterização molecular de alguns dos integróes encontrados. Do trabalho realizado foi possível concluir que os integróes se encontram disseminados na comunidade, que nem sempre conferem vantagem selectiva às estirpes que os possuem, que a sua região variável é idêntica em estirpes diferentes que apresentam integróes de tamanho semelhante. 0s resultados sugerem ainda que para além dos integróes existem outros mecanismos responsáveis pelos fenótipos de resistência observados nas estirpes estudadas.; The emergente of antibiotic resistance among pathogenic and commensal bacteria has become a serious problem worldwide. Mobile elements such as integrons are able to facilitate the spread of resistance genes between bacterial species. In this work, severa1 strains of Pseudomonas aeruginosa and Brevibacterium spp. have been screened for the presence of integrons. Some of these integrons have been characterized. The results obtained suggest that integrons are widespread in the community...

Perfil de suscetibilidade in vitro e caracterização molecular de leveduras do gênero Candida isoladas de pacientes com vulvovaginite

Fornari, Gheniffer
Fonte: Universidade Federal do Paraná Publicador: Universidade Federal do Paraná
Tipo: Dissertação Formato: 65 f. : il. (algumas color.), tabs. ; 30 cm.; application/pdf
PORTUGUêS
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Orientador : Prof. Dr. Flávio Queiroz Telles Filho; Co-orientadores : Profª Drª Vania Aparecida Vicente e Profº. Drº. Newton Sérgio de Carvalho; Dissertação (mestrado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Ciências Biológicas (Microbiologia, Parasitologia e Patologia Básica). Defesa: Curitiba, 21/03/2013; Inclui bibliografias; Área de concentração: Microbiologia; Resumo: A candidíase vulvovaginal afeta mulheres em idade reprodutiva representando aproximadamente 15 a 25% dos casos de vaginites. As diferentes espécies de Candida relacionadas à infecção podem ser encontradas na mucosa vaginal como colonizadoras e, em condições apropriadas, aceleram o processo de multiplicação e expressam fatores de virulência. O objetivo deste trabalho foi isolar leveduras de pacientes com ausência de sintomas clínicos (grupo colonizado) e de portadores da infecção. O perfil de sensibilidade in vitro destes isolados foi estabelecido e marcadores moleculares utilizados para identificar a distribuição das espécies. Um total de 40 isolados foram obtidos e identificados através do Cromoagar, sistema API20aux e pelo seqüenciamento das regiões ITS e D1/D2 do gene DNAr. Diferentes isolados de C. albicans foram genotipados pelo sistema ABC. A análise multilocus confirmou isolados das espécies Candida albicans...

Caracterización fisiológica y molecular del proceso de decoloración de un efluente industrial con el basidiomiceto "Coriolopsis gallica"

Yagüe Plaza, Susana
Fonte: Universidade de Alcalá Publicador: Universidade de Alcalá
Tipo: info:eu-repo/semantics/doctoralThesis; info:eu-repo/semantics/acceptedVersion Formato: 20836839 bytes; application/pdf
SPA
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45.95%
El trabajo de investigación titulado "Caracterización fisiológica y molecular del proceso de decoloración de un efluente industrial con el basidiomiceto Coriolopsis gallica" constó de tres partes fundamentales. En la primera, se realizó una caracterización del efluente procedente de la industria cervecera y se analizó la capacidad de crecimiento y degradación de C. gallica sobre el mismo, con el objetivo final de aplicar este hongo in vitro en el tratamiento de este tipo de efluentes, o de aquellos que muestren características similares. En la segunda parte, se optimizaron las condiciones de cultivo para la degradación del efluente y se estudiaron los mecanismos involucrados en el proceso degradativo con especial énfasis en la maquinaria enzimática responsable del mismo, así como el aspecto molecular de la producción de lacasa por este basidiomiceto. De esta forma se estudió la expresión génica del gen de lacasa en condiciones de alta decoloración y la capacidad de esta enzima de decolorar el efluente in vitro, utilizando caldos enzimáticos con alta actividad lacasa. La tercera etapa del trabajo consistió en la puesta a punto de un sistema de expresión heterólogo del gen de lacasa de C. gallica en la levadura Saccharomyces cerevisiae como una herramienta necesaria para expresar el gen de interés en forma heteróloga...

Receptores N-metil-D-aspartato e toxicidade do peptídeo ß-amilóide

Domingues, António Miguel de Jesus
Fonte: Universidade de Aveiro Publicador: Universidade de Aveiro
Tipo: Dissertação de Mestrado
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45.95%
A doença de Alzheimer (DA) é uma doença neurodegenerativa resultado da perda irreversivel de neurónios, principalmente no hipocampo e córtex cerebral. Esta doença manifesta-se clinicamente pela perda progressiva de memória, perturbações das funções cognitivas e alterações de comportamento. Estas alterações são o A DA caracteriza-se histopatologicamente pela presença de placas senis, devido á acumulação extracelular do peptideo p-amilóide (Ap), e por tranças neurofibrilhares, resultantes da hiperfosforilação da proteína tau. A toxicidade induzida pelo peptídeo Ap está associada a excitotoxicidade, que consiste na libertação excessiva de glutamato e sobreactivação dos receptores N-metil-D-aspartato (NMDA), conduzindo ao aumento da concentração intracelular de cálcio e, consequentemente, a morte neuronal. Os receptores NMDA são compostos pelas subunidades NRI, NR2A-D e NR3A-B que se associam em vários subtipos com diferentes características funcionais e farmacológicas, e distribuem-se de forma heterogénea pelo sistema nervoso central. Neste trabalho, avaliou-se a influência de diferentes subtipos de receptores NMDA na toxicidade do peptideo A~I.~,,. Para tal, expressaram-se os subtipos NRIINRZA ou NRIINRZB em células HEK293. A exposição ao peptideo Ap1.40 diminuiu a capacidade redutora em células que expressavam NRIINRZA ou NRIINRZB. Porém...

O efeito do stress celular na proteína precursora de amilóide de Alzheimer = The effect of cellular stress on the Alzheimer's amyloid precursor protein

Henriques, Ana Gabriel da Silva Cavaleiro
Fonte: Universidade de Aveiro Publicador: Universidade de Aveiro
Tipo: Dissertação de Mestrado
POR
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45.95%
A proteína precursora de amilóide de Alzheimer (APP) é um factor chave na doença de Alzheimer (AD). Essencialmente o processamento da APP resulta na produção de Abeta, o peptídeo tóxico depositado nas placas de amilóide dos indivíduos com AD. Ainda permanece por esclarecer se o processamento da APP é afectado sob condições de stress celular, potencialmente aumentando a quantidade de Abeta produzida. Além disso, o stress celular pode induzir alterações moleculares, associadas à AD, que podem representar marcadores moleculares úteis para o diagnóstico da AD. Com estas questões em mente, procurámos identificar alterações, em resposta ao stress celular, no processamento da APP e na expressão de outras proteínas. Nestes estudos de monitorização considerámos que a fosforilação proteica anormal e o stress oxidativo podem contribuir para a condição patológica. Assim, investigámos o processamento da APP dependente da fosforilação durante o stress celular. Os dados obtidos confirmam que a secreção da APP é reduzida em situações de stress, e que o efeito é idêntico em linhas celulares de tipo neuronal e não neuronal. Os resultados obtidos revelam que o PMA, mesmo em situações de stress (azida de sódio 1 mM) pode afectar o processamento da APP...

Caracterização molecular de populações microbianas em reactores anaeróbios

Grilo, André Manuel Sardinha
Fonte: Universidade de Lisboa Publicador: Universidade de Lisboa
Tipo: Dissertação de Mestrado Formato: application/pdf
Publicado em //2009 POR
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45.98%
Tese de mestrado, Biologia (Microbiologia Aplicada), 2009, Universidade de Lisboa, Faculdade de Ciências; A necessidade do reaproveitamento de águas residuais tem vindo a aumentar. Os processos anaeróbios de tratamento de águas residuais apresentam-se actualmente como a melhor solução custo-eficácia para a purificação de poluentes orgânicos provenientes dos desperdícios industriais e domésticos. Um melhor conhecimento sobre as populações microbianas responsáveis pelos processos metabólicos que ocorrem nos reactores anaeróbios é essencial para um melhor controlo e optimização do funcionamento do reactor. Nas últimas décadas, os métodos de biologia molecular para caracterização dos genes que codificam o rRNA 16S, têm sido aplicados com sucesso na caracterização das populações microbianas presentes em reactores anaeróbios, uma vez que essa metodologia não depende do cultivo para identificação dos microrganismos. Com o presente trabalho, pretendeu-se contribuir para a caracterização das comunidades microbianas presentes em dois reactores anaeróbios a operar de modo diferente, um a operar de modo contínuo e o outro a operar de modo intermitente. Para a caracterização da população microbiana foi utilizada uma estratégia combinando os métodos de extracção de DNA...

Application of molecular nucleic acid-based techniques for the study of microbial communities in monuments and artworks; Aplicación de técnicas moleculares basadas en ácidos nucleicos al estudio de comunidades microbianas en monumentos y obras de arte

González Grau, Juan Miguel; Sáiz-Jiménez, Cesáreo
Fonte: Sociedad Española de Microbiología Publicador: Sociedad Española de Microbiología
Tipo: Artículo
ENG
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Microorganisms play critical roles in every kind of habitat on Earth, including those constructed by humans. Thus, our cultural heritage is affected by microbial colonization. While classical microbiological methods based on culturing procedures have provided important, but limited information on the microbial diversity of natural samples, novel molecular techniques have been extremely valuable in unraveling the diversity of microbiota involved in the biodeterioration of our monuments and artworks. The knowledge gained from these approaches has allowed the design of strategies for conserving and protecting monuments for the benefit of future generations. This review describes the state-of-the-art of the application of molecular methods to the analysis of cultural assets, and provides nearfuture perspectives on the subject.; Los microorganismos desempeñan papeles críticos en todo tipo de hábitat de la Tierra, incluso en los que han sido construidos por los humanos. Así, el patrimonio cultural también se ve afectado por la colonización de microorganismos. Mientras los métodos clásicos de microbiología basados en procedimientos de cultivo han proporcionado información importante, pero limitada, de las muestras naturales...