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Effect of glutamate and inosinate on sensory and instrumental texture of extruded products

CASSAR, Renata; SARDINHA, Fátima Aparecida Arantes; AREAS, Jose Alfredo Gomes
Fonte: Oxford Publicador: Oxford
Tipo: Artigo de Revista Científica
ENG
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Expanded products have been developed by extrusion of non-conventional highly nutritious raw materials such as amaranth and chickpea blended with bovine lung. As sensory acceptance of these snacks is restricted, this study aimed at improving their texture, through the addition of monosodium glutamate (MSG) and disodium inosinate (IMP) flavor enhancers to the feeding material, or to the flavor added after the extrusion. Sensory and mechanical analyses showed that both enhancers affected texture, assessed by sensory and instrumental methods. Addition of IMP together with MSG to the chickpea-based snacks presented the best results. This beneficial effect was not observed in the amaranth-based snack, suggesting that IMP and MSG can favorably impact texture of extruded products depending on the amount and type of protein present; FAPESP [98/08095-9, 03/10246-5]; CNPq

Análise da sensibilidade do gosto umami em crianças com câncer; Analyzing sensitiveness to umami taste in children with cancer

ELMAN, Ilana; SOARES, Nilson Silva; PINTO E SILVA, Maria Elisabeth Machado
Fonte: Rio de Janeiro Publicador: Rio de Janeiro
Tipo: Artigo de Revista Científica
POR
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O câncer pediátrico possui alta incidência, principalmente a leucemia linfoide aguda e o linfoma não Hodgkin. A quimioterapia, devido a seus efeitos colaterais, diminui a ingestão de alimentos, por causar alteração do paladar, ressecamento da boca, náuseas e ou vômitos. A sensação do gosto é responsável pela detecção e resposta ao estímulo doce, salgado, azedo, amargo e umami, este último proveniente do glutamato monossódico, o qual está relacionado ao aumento da palatabilidade de preparações, fato que pode colaborar para a melhoria da aceitação alimentar em pacientes pediátricos com câncer. O objetivo deste estudo foi identificar os limiares de detecção do gosto umami em crianças portadoras de câncer que seguem os protocolos quimioterápicos: GBTLI LLA 97, 99 e 2009 e LNH 2000. Foi aplicado o teste de sensibilidade de Threshold em duplicata para determinação do limiar do gosto umami, utilizando seis concentrações crescentes de água deionizada e glutamato monossódico. Os dados foram analisados com auxílio do programa Epinfo 6.0. Foram avaliados 69 pacientes, 63,8por cento do sexo masculino; 69,6 por cento portadores de leucemia linfoide aguda e o restante de linfoma não Hodgkin. Em relação à idade...

Retinal cell death induced by TRPV1 activation involves NMDA signaling and upregulation of nitric oxide synthases

Leonelli, Mauro; Martins, Daniel de Oliveira; Britto, Luiz Roberto Giorgetti de
Fonte: Kluwer Academic/Plenum Publishers; New York Publicador: Kluwer Academic/Plenum Publishers; New York
Tipo: Artigo de Revista Científica
ENG
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The activation of the transient receptor potential vanilloid type 1 channel (TRPV1) has been correlated with oxidative and nitrosative stress and cell death in the nervous system. Our previous results indicate that TRPV1 activation in the adult retina can lead to constitutive and inducible nitric oxide synthase-dependent protein nitration and apoptosis. In this report, we have investigated the potential effects of TRPV1 channel activation on nitric oxide synthase (NOS) expression and function, and the putative participation of ionotropic glutamate receptors in retinal TRPV1-induced protein nitration, lipid peroxidation, and DNA fragmentation. Intravitreal injections of the classical TRPV1 agonist capsaicin up-regulated the protein expression of the inducible and endothelial NOS isoforms. Using 4,5-diaminofluorescein diacetate for nitric oxide (NO) imaging, we found that capsaicin also increased the production of NO in retinal blood vessels. Processes and perikarya of TRPV1-expressing neurons in the inner nuclear layer of the retina were found in the vicinity of nNOS-positive neurons, but those two proteins did not colocalize. Retinal explants exposed to capsaicin presented high protein nitration, lipid peroxidation, and cell death...

Changes in renal glucose transporters in an animal model of metabolic syndrome

Lehnen, A. M.; Leguisamo, N. M.; Dias, L. D.; Pinto, G. H.; Okamoto, N. M.; Machado, Ubiratan Fabres; Schaan, B. D.
Fonte: Thieme; Stuttgart Publicador: Thieme; Stuttgart
Tipo: Artigo de Revista Científica
ENG
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Considering the similarity between structural, hemodynamic, and functional changes of obesity-related renal disease and diabetic nephropathy, we hypothesized that renal glucose transporter changes occur in obesity as in diabetes. The aim of the work was to evaluate GLUT1 and GLUT2 in kidneys of an animal model of metabolic syndrome. Neonate spontaneously hypertensive rats (SHR), n=15/group, were treated with monosodium glutamate (5 mg/g) (MetS) for 9 days and compared with saline-treated Wistar-Kyoto (C) and SHR (H) rats. Lee index, systolic arterial pressure (SAP), glycemia, insulin resistance, triglycerides, and HDL cholesterol were evaluated at 3 and 6 months. Medullar GLUT1 and cortical GLUT2 were analyzed by Western blot. MetS vs. C and H rats had the highest Lee index (p<0.001) and insulin resistance (3-months C: 4.3±0.7, H: 3.9±0.9, MetS: 2.7±0.6; 6-months C: 4.2±0.6, H: 3.8±0.5, MetS: 2.4±0.6% • min−1, p<0.001), similar glycemia, and the lowest HDL-cholesterol at 6-months (p<0.001). In the MetS and H rats, SAP was higher vs. C at 3-months (p<0.001) and 6-months (C: 151±15, H: 190±11, MetS: 185±13 mm Hg, p<0.001) of age. GLUT1 was ̴ 13× lower (p<0.001) at 3-months, reestablishing its content at 6-months in MetS group...

Purinergic and glutamatergic interactions in the hypothalamic paraventricular nucleus modulate sympathetic outflow

Neto, Hildebrando Candido Ferreira; Yao, S. T.; Antunes, Vagner Roberto
Fonte: Springer; Dordrecht Publicador: Springer; Dordrecht
Tipo: Artigo de Revista Científica
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P2X receptors are expressed on ventrolateral medulla projecting paraventricular nucleus (PVN) neurons. Here, we investigate the role of adenosine 5′-triphosphate (ATP) in modulating sympathetic nerve activity (SNA) at the level of the PVN. We used an in situ arterially perfused rat preparation to determine the effect of P2 receptor activation and the putative interaction between purinergic and glutamatergic neurotransmitter systems within the PVN on lumbar SNA (LSNA). Unilateral microinjection of ATP into the PVN induced a dose-related increase in the LSNA (1 nmol: 38 ± 6 %, 2.5 nmol: 72 ± 7 %, 5 nmol: 96 ± 13 %). This increase was significantly attenuated by blockade of P2 receptors (pyridoxalphosphate-6-azophenyl-20,40-disulphonic acid, PPADS) and glutamate receptors (kynurenic acid, KYN) or a combination of both. The increase in LSNA elicited by L-glutamate microinjection into the PVN was not affected by a previous injection of PPADS. Selective blockade of non-N-methyl-D-aspartate receptors (6-cyano-7-nitroquinoxaline-2,3-dione disodium salt, CNQX), but not N-methyl-D-aspartate receptors (NMDA) receptors (DL-2-amino-5-phosphonopentanoic acid, AP5), attenuated the ATP-induced sympathoexcitatory effects at the PVN level. Taken together...

Indicadores de lesão muscular e inflamação em ciclistas de elite em diferentes situações competitivas.; Muscle damage and inflammatory indicators in road cyclists following different road cycling races.

Souza, Helio Antonio Corrêa de
Fonte: Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP Publicador: Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP
Tipo: Dissertação de Mestrado Formato: application/pdf
Publicado em 13/03/2008 PT
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O estudo investigou o efeito de diferentes competições de ciclismo de estrada e de um período de descanso na Creatina Kinase (CK), Lactato Desidrogenase (LDH), Interleucina-1 (IL-1), Interleucina-6 (IL-6), Fator de necrose tumoral (TNF-a), prostaglandina E2 (PGE2) e na razão Glutamina/Glutamato (Gln/Glu). Para isso, 12 ciclistas profissionais que completaram 3 diferentes competições. A primeira e a terceira (C1 e C3) competições foram de uma 1 etapa e a segunda foi uma volta ciclística (C2) de 7 dias. A C3 foi realizada após um período de 20 dias de descanso. Foram coletadas amostras de sangue 24 horas antes do início e 24 horas após o término de cada competição. Não houve diferenças significativas para nenhum dos mediadores inflamatórios (p<0,05). Aumentos (p<0,05) foram encontrados após o término da C2 e da C3 para CK e LDH e diminuição (p<0,05) na razão Gln/Glu C3. A conclusão foi a de que lesões musculares são diagnosticadas em ciclistas profissionais de estrada após o término de uma volta ciclística e de uma competição precedida de um período de descanso.; The objective of this research was to observe the effect of different road cycling competitions and a 20 days break period in Creatine Kinase (CK)...

Aminopeptidase neutra, dipeptidil peptidase IV, CD13, CD26 e Fos no hipotálamo e hipocampo de ratos com obesidade induzida por glutamato monossódico e privados de alimento; Hypothalamic and hippocampal neutral aminopeptidase, dipeptidyl peptidase IV, CD13, CD26 and Fos in glutamate monosodium induced obesity and food deprivation in rats

Vendrame, Rafaela Fadoni Alponti
Fonte: Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP Publicador: Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP
Tipo: Dissertação de Mestrado Formato: application/pdf
Publicado em 14/10/2008 PT
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Alterações na atividade de peptidases no sistema nervoso central (SNC) de adictos a narcóticos, abstinentes dependentes de opióides, diabéticos e indivíduos com desequilíbrio hidrosalino, têm sido achados instigantes no contexto atual dos conhecimentos sobre o balanço energético. Neste sentido, são particularmente interessantes o fenômeno da proteólise irrestrita e o envolvimento de diversos peptídeos do SNC, especialmente no hipotálamo e hipocampo, como as incretinas, neuropeptídeo Y, peptídeo YY, peptídeos derivados da proopiomelanocortina (melanocortinas e beta-endorfinas), somatostatina, vasopressina e angiotensinas. O presente estudo avaliou a hipótese de que aminopeptidases que têm alguns desses peptídeos como substratos, a aminopeptidase neutra (APN) (sensível PSA, e insensível APM/CD13, à puromicina) e a dipeptidil peptidase IV (DPPIV/CD26) (sensível - DPPIV-DS, e insensível - DPPIV-DI à diprotina), poderiam relacionar-se com a obesidade induzida por glutamato monossódico (MSG) e com o estado de privação alimentar. Foram analisadas as expressões gênica e protéica da CD13 e CD26, as atividades enzimáticas de PSA, APM, DPPIV-DS e DPPIV-DI em fração solúvel e de membrana solubilizada, a ativação celular (imuno-reatividade a Fos)...

Estudo do comportamento térmico de alguns aditivos alimentares por TG/DTG, DTA e DSC; Thermal behavior studies of some food additives by TG/STG, STA and DSC

Nunes, Ronaldo Spezia
Fonte: Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP Publicador: Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP
Tipo: Tese de Doutorado Formato: application/pdf
Publicado em 13/04/2009 PT
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Estudos termoanalíticos de alguns aditivos alimentares da classe dos realçadores de sabor foram desenvolvidos visando avaliar sua estabilidade e resistência durante o preparo de alimentos a quente assim como investigar os eventuais intermediários de decomposição que poderiam resultar destes processos. Os sais foram obtidos de fontes industriais ou sintetizados e submetidos à caracterização por análise elementar, espectrometria vibracional na região do infra-vermelho, termogravimetria/termogravimetria derivada, análise térmica diferencial e em alguns casos, calorimetria exploratória diferencial. Foram estudados o ácido glutâmico e seus sais de amônio, lítio e sódio mono e dissubstituídos. Em todos os casos observou-se uma conversão a piroglutamato após desidratação dos sais monossubstituídos, a qual ocorre via a a-carboxila. A estabilidade térmica destes sais foi da ordem de 190-200 °C. No caso dos sais dissubstituídos de lítio e sódio não houve conversão ao piroglutamato pois as duas carboxilas estão salificadas. Os glutamatos de magnésio, cálcio estrôncio e bário, também foram preparados e investigados quanto ao seu comportamento térmico. Os sais se formaram na estequiometria 2:1 (ligante:metal)...

Distribuição de receptores ionotrópicos de glutamato e sua co-localização com a fosfoproteína neural DARPP-32 no córtex pré-frontal de ratos.; Distribution of ionotropic glutamate receptors and their co-localization with the phosphoprotein DARPP-32 in the medial prefrontal córtex of rats.

Sambé, Nicolau Agostinho
Fonte: Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP Publicador: Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP
Tipo: Tese de Doutorado Formato: application/pdf
Publicado em 27/11/2009 PT
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O córtex pré-frontal medial (PFCm) é caracterizado por entradas glutamatérgicas e dopaminérgicas que convergem sobre os mesmos neurônios alvos. Devido à escassa informação sobre as bases anatômicas das interações entre a dopamina (DA) e o glutamato (Glu), mapeamos a distribuição de subunidades (Su) de receptores (Rs) de Glu do tipo AMPA, NMDA e kainato no PFCm e investigamos a sua expressão em neurônios contendo a fosfoproteína DARPP-32 e em interneurônios. Os resultados mostram que as Su GluR2/3 dos Rs do tipo AMPA são as mais amplamente distribuídas no PFCm e expressas em todos os neurônios DARPP-32+. GluR2/3 é também amplamente co-localizado com as Su NMDAR1 dos Rs de Glu do tipo NMDA e GluR5/6/7 dos Rs do tipo kainato. Em contraste, as Su GluR1 e GluR4 são somente fracamente expressos no PFCm e não são co-localizados com DARPP-32, porém com GABA ou parvalbumina. Os resultados indicam que as Su GluR2/3, NMDAR1 e GluR5/6/7 são amplamente expressos em neurônios piramidais DARPP-32+ enquanto GluR1 e GluR4 são predominantemente expressos em interneurônios do PFCm.; The medial prefrontal cortex (PFCm) is characterized by glutamatergic and dopaminergic afferents that converge on the same target neurons. Since there is only limited information about the anatomical bases for interactions between dopamine (DA) and glutamate (Glu)...

Caracterização molecular e bioquímica da prolina desidrogenase de Trypanosoma cruzi, um possível alvo terapêutico.; Molecular and Biochemical Characterization of the proline dehydrogenase of T. cruzi, a possible therapeutical target .

Vieira, Lisvane Paes
Fonte: Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP Publicador: Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP
Tipo: Tese de Doutorado Formato: application/pdf
Publicado em 15/09/2010 PT
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Os nossos resultados demonstraram a atividade enzimática prolina desidrogenase (PRODH) do produto do gene anotado como codificante de uma prolina oxidase na base dados do genoma de Trypanosoma cruzi. A atividade da proteína codificada por esse gene foi avaliada inicialmente por complementação de uma linhagem de S. cerevisiae deficiente na expressão funcional da PRODH endógena, e posteriormente mediante a obtenção da enzima recombinante ativa expressa em um sistema bacteriano. Nos estudos feitos tanto com leveduras complementadas com o gene PRODH, quanto com as formas epimastigotas de T. cruzi, observamos que nesses organismos há uma correlação positiva entre o nível intracelular de prolina livre e a resistência ao estresse oxidativo. Através dos ensaios de RT-PCR quantitativo observamos que o RNAm do gene da PRODH é regulado ao longo do ciclo de vida do T. cruzi, com maior nível de expressão no estágio epimastigota intracelular, perfil apresentado também em experimentos de Western Blotting, o que é concordante com o papel fundamental desse aminoácido na diferenciação dessa forma para as forma tripomastigota. Nos diferentes ensaios de localização subcelular observou-se que a proteína PRODH está presente na mitocôndria. A seqüência da PRODH apresenta um sítio EF-hand de ligação a Ca2+. Mostramos experimentalmente a funcionalidade desse sítio e a sua função na regulação da atividade por Ca2+. Em ensaios de respiração mitocondrial...

Envolvimento de Rac1 na excitotoxicidade induzida por NMDA na retina de ratos.; Involvement of Rac1 in NMDA-induced excitotoxicity in the rat retina.

Saito, Kelly Cristina
Fonte: Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP Publicador: Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP
Tipo: Tese de Doutorado Formato: application/pdf
Publicado em 19/09/2011 PT
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A ativação excessiva dos receptores NMDA tem sido descrita no disparo da morte neuronal que ocorre em doenças, como o glaucoma. É possível que a combinação de subunidades (NR2A-D) possa ativar vias de sinalização intracelulares que resultam na morte ou sobrevivência. Nosso objetivo foi investigar o envolvimento de subunidades NR2 e Rac1, membro da família Rho GTPase, na morte de neurônios da retina. A morte induzida por glutamato in vitro foi reduzida após a inibição de Rac1 e bloqueio de NR2B, mas não das subunidades NR2C/D. Resultados semelhantes foram obtidos in vivo após injeção intravítrea NMDA, e a detecção de Rac1 ativo, principalmente, nos processos de glia de Müller foi inibida pelo bloqueio NR2B. Além disso, a produção de TNF-α após a injeção de NMDA foi reduzida pelo bloqueio de NR2B e Rac1. Assim, nossos resultados sugerem que a excitotoxicidade via receptores NR2B/NMDA ativa Rac1 em células da glia de Müller, que por sua vez controla a produção de TNF-α possível responsável pela morte de células ganglionares da retina.; Overactivation of NMDA receptors has been described to trigger neuronal death that occurs in diseases such as glaucoma. It is possible that the combination of subunits (NR2A-D) activate intracellular signaling pathways that result in death or survival. Our aim was to investigate the involvement of NR2 subunits and Rac1...

Efeitos da exposição ao etanol em camundongos adolescentes e adultos: comportamentos relacionados à recompensa, sensibilização comportamental e o papel dos sistemas dopaminérgico e glutamatérgico.; Effects of ethanol exposure in adolescent and adult mice: behaviors related to reward, behavioral sensitization and the role of the dopaminergic and glutamatergic systems.

Nascimento, Priscila Fernandes Carrara do
Fonte: Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP Publicador: Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP
Tipo: Tese de Doutorado Formato: application/pdf
Publicado em 16/09/2011 PT
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O uso de drogas de abuso inicia-se principalmente na adolescência, um período em que o sistema nervoso central está passando por mudanças maturacionais neuroquímicas e neuroanatômicas. Assim, o objetivo desse projeto foi avaliar efeitos comportamentais e neuroquímicos da exposição ao etanol em camundongos adolescentes e adultos. O presente projeto investigou: o desenvolvimento da sensibilização comportamental ao etanol em camundongos adolescentes e adultos; possíveis alterações na sinalização dopaminérgica e glutamatérgica no núcleo accumbens e estriado de camundongos sensibilizados ao etanol durante a adolescência; participação da via AMPc/PKA na sensibilização comportamental ao etanol em camundongos adolescentes e adultos; efeitos reforçadores do etanol em camundongos adolescentes e adultos por meio do modelo de auto-administração; efeitos reforçadores do etanol utilizando-se o aparelho de preferência condicionada de lugar, que possibilita a quantificação do tempo de permanência do animal no ambiente associado aos efeitos da droga; efeito de intoxicações crônicas seguidas de abstinência no padrão de consumo.; The use of drugs of abuse begins mainly in adolescence, a period in which the central nervous system is undergoing neurochemical and neuroanatomical maturation changes. Thus...

Análise do sistema ativo de captação de glutamina de Streptococcus mutans.; Analysis of the glutamine active transport system of Streptococcus mutans.

Guimarães, Karine Souza
Fonte: Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP Publicador: Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP
Tipo: Dissertação de Mestrado Formato: application/pdf
Publicado em 24/10/2011 PT
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A glutamina e o glutamato são aminoácidos importantes no metabolismo bacteriano. A captação desses aminoácidos ocorre por meio de transportadores ativos do tipo ABC. No presente estudo avaliamos os sistemas de captação de glutamina/glutamato em Streptococcus mutans. Análises in silico revelaram a presença de dois operons que codificam sistemas de transporte de glutamina/glutamato: o operon gln, composto pelos genes e um segundo operon putativo composto pelos genes smu.1177c, smu.1178c e smu.1179c. Por meio de mutagênese sítio-específica foi possível obter a deleção do operon constituído pelos genes smu.1177c, smu.1178c e smu.1179c. O mutante (linhagem KG1) obtido apresentou redução na captação de glutamato e glutamina. O mesmo ocorreu em relação ao mutante deficiente no operon gln. O mutante KG1 apresentou maior capacidade de adesão a superfícies abióticas. Os resultados obtidos revelaram que tanto o operon gln como o operon definido pelos genes smu.1177c, smu.1178c e smu.1179c estão envolvidos na captação de glutamina e glutamato pelo S. mutans.; Glutamine and glutamate are important amino acids for bacteria metabolism. Their uptake occurs via active transporter systems of the ABC family. On the present study we evaluate the glutamine/glutamate transport systems of Streptococcus mutans. In silico analysis revealed the presence of two polycistronic operons related to transport of glutamine/glutamate: the gln operon and a putative operon composed by smu.1177c...

Caracterização funcional e papel fisiológico da D1-pirrolina-5-carboxilato desidrogenase de Trypanosoma cruzi: uma enzima do metabolismo de prolina.; Functional characterization and physiological role of the D1-pyrroline-5-caboxylate dehydrogenase from Trypanosoma cruzi (TcP5CDH): an enzyme of proline metabolism.

Mantilla, Brian Alejandro Suarez
Fonte: Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP Publicador: Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP
Tipo: Tese de Doutorado Formato: application/pdf
Publicado em 10/07/2013 PT
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A prolina é convertida em glutamato através de dois passos de oxidorredução. Primeiro, prolina é oxidada em D1-pirrolina-5-carboxilato (P5C) que é convertido em glutamato pela TcP5CDH. Neste trabalho demonstrou-se que a enzima TcP5CDH catalisa a oxidação irreversível de gGSA formando glutamato e NADH/NADPH. A TcP5CDH forma um hexâmero que interage com a membrana interna mitocondrial. Os elétrons a partir de NADH abastecem a cadeia transportadora de elétrons para a síntese de ATP. Além disso vimos que a TcP5CDH é regulada positivamente nos estágios infectivos do parasita e, quando esta é induzida pela inserção de uma cópia ectópica, os mutantes apresentam mudanças morfológicas e alterações na expressão da TcGP82. O DSF, reportado como inibidor de aldeído desidrogenasses, interfere na atividade da TcP5CDH, bem como exibiu um efeito tripanocida. Ensaios de RNAi para a TbP5CDH e a análise da expressão desta enzima nas formas do parasita presentes na mosca tsé-tsé também foram discutidos. Os nossos dados reforçam a relevância bioquímica da via prolina-glutamato em T. cruzi, e constituem as primeiras evidências sobre a ocorrência do metabolismo de P5C nessas espécies de tripanossomatídeos.; Proline is converted into glutamate through two oxidorreduction steps. First...

Análise do papel dos transportadores ABC de oligopeptídeos, poliaminas, fosfato inorgânico, glutamato e glutamina na fisiologia e patogênese de bactérias do trato gastro-intestinal.; Analysis of the role of ABC transporters of oligopeptides, polyamines, inorganic phosphate, glutamate and glutamine in the physiology and pathogenesis of gastrointestinal tract bacteria.

Lima, Roberto Nepomuceno de Souza
Fonte: Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP Publicador: Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP
Tipo: Tese de Doutorado Formato: application/pdf
Publicado em 05/08/2013 PT
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Neste estudo focamos no papel de cinco transportadores da família ABC (ATP-binding cassete) envolvidos com a captação ativa de oligopeptídeos, poliaminas, fosfato inorgânico, glutamato e glutamina, em duas espécies bacterianas: Streptococcus mutans, que causa a cárie, e Escherichia coli enterohemorrágica (EHEC), responsável por diarreias e síndrome hemolítica urêmica em humanos. Com relação a inativação do sistema de transporte de oligopeptídeos de S. mutans não observamos alteração do crescimento bacteriano ou da aderência à superfícies abióticas. A deleção do sistema de captação de poliaminas não interferiu com o crescimento em meio rico, porém aumentou a resistência à ambiente ácidos. Inativação do sistema de transporte de fosfato inorgânico reduziu a aderência de S. mutans. Sobre os sistemas de transporte de glutamato e glutamina, mutantes de S. mutans apresentaram alterações nas taxas de crescimento e adesão à superfícies. Inativação da proteína OppA de EHEC não afetou a produção da toxina Stx bem como a patogenicidade in vitro e in vivo de EHEC. Em suma, o presente estudo demonstra que o papel dos transportadores ABC na fisiologia e patogenicidade de bactérias pode variar de acordo com a espécies bem como com o substrato transportado.; This study focuses on the role of five ABC (ATP-binding cassette) transport systems related to active uptake of oligopeptides...

Caracterização bioquímica e molecular da glutamina sintetase de Trypanosoma cruzi.; Biochemical and molecular characterization of glutamine synthetase of Trypanosoma cruzi.

Crispim, Marcell
Fonte: Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP Publicador: Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP
Tipo: Dissertação de Mestrado Formato: application/pdf
Publicado em 12/12/2013 PT
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Trypanosoma cruzi, utiliza os aminoácidos como importantes metabólitos para sua manutenção e viabilidade, dentre eles glutamato e glutamina que participam no suprimento energético, metaciclogênese e síntese de pirimidinas. Neste trabalho a glutamina sintetase de T. cruzi (TcGS) foi estudada sob a hipótese de contribuir com a detoxificação de NH4+. Extratos de T. cruzi e a enzima recombinante pura foram utilizados na caracterização cinética e determinação da conformação oligomérica. Na forma amastigotas, observamos que TcGS é mais expressa e ativa. Além disso, a metionina sulfoximina (MS) inibiu TcGS de maneira competitiva e com alta afinidade e reduziu a proliferação de epimastigotas em excesso extracelular de NH4+, relacionando TcGS com a detoxificação dessa molécula. Assim, o tratamento com MS ao longo do ciclo intracelular reduziu a eclosão de formas tripomastigotas de células CHO-K1, ressaltanto a importância da GS no metabolismo de nitrogênio e no ciclo de vida de T. cruzi.; Trypanosoma cruzi uses amino acids as important metabolites for its maintenance and viability, glutamate and glutamine are involved in energy supply, metacyclogenesis and synthesis of pyrimidines. It was described here the glutamine synthetase of T. cruzi (TcGS)...

Comparação entre métodos de modelagem aplicados à enzima α-L-IDURONIDASE e análise dos mutantes R89W e R89Q

Figueiredo, Danieli Forgiarini
Fonte: Universidade Federal do Rio Grande do Sul Publicador: Universidade Federal do Rio Grande do Sul
Tipo: Dissertação Formato: application/pdf
POR
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A Mucopolissacaridose do tipo I é uma doença autossômica recessiva, causada por mutações na enzima α-L-iduronidase, a qual é responsável pela degradação dos glicosaminoglicanos heparan sulfato e dermatan sulfato. Pacientes MPS I apresentam um amplo espectro de manifestações clínicas que vão desde a forma mais grave da doença (Síndrome de Hurler) até a forma mais branda (síndrome de Scheie). A gravidade da doença está intimamente relacionada a mutações na enzima α-L-iduronidase, as quais podem ter um impacto tanto na estabilidade quanto na atividade enzimática. O objetivo principal deste trabalho foi realizar a modelagem molecular da enzima α-L-iduronidase humana utilizando diferentes metodologias. A partir dessas modelagens realizamos comparações com a estrutura cristalografada dessa proteína (PDB ID: 4JXP - publicado após a obtenção dos modelos), com o intuito de detectar o método mais apropriado para modelagens que apresentam moldes de baixa identidade. Adicionalmente, avaliamos através da dinâmica molecular duas mutações - R89W e R89Q - que ocorrem no mesmo resíduo da IDUA e apresentam impactos diferenciados sobre a função da proteína. Dentre as técnicas de modelagem utilizadas nesse trabalho as que apresentaram os melhores desempenhos foram a modelagem mista (utilizando a ferramenta I-tasser) bem como a modelagem por homologia (através da ferramenta Modeller 9v9) utilizando um alinhamento baseado em reconhecimento de padrões de enovelamento. Em relação à validação dos modelos destacamos a importância da utilização de diferentes ferramentas de validação...

Esclerose multipla : espectroscopia de protons de resolução do liquor e correlação com atividade inflamatoria; Multiple sclerosis: high resolution magnetic resonance spectroscopy and correlation with inflammatory course

Fabiano Reis
Fonte: Biblioteca Digital da Unicamp Publicador: Biblioteca Digital da Unicamp
Tipo: Tese de Doutorado Formato: application/pdf
Publicado em 27/02/2007 PT
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Estudamos o líquor (LCR) de 24 pacientes com esclerose múltipla (EM) e 11 sujeitos controles por espectroscopia de prótons de alta resolução por ressonância magnética. A aplicação da espectroscopia de prótons do LCR pode detectar metabólitos em situações normais e patológicas. O objetivo deste trabalho foi avaliar quais alterações metabólicas estão associadas à EM e estabelecer se as alterações da composição do líquor dos pacientes com EM reflete alterações metabólicas que ocorrem nesta doença desmielinizante. Foram analisadas amostras de líquor obtidas por punção lombar em 24 pacientes com EM (clinicamente definida), 9 homens e 15 mulheres, com idade média de início da doença de 30 anos; pacientes com polineuropatia idiopática, cefaléia, síndromes meningorradiculares e um paciente que fora submetido à punção para mielo-CT, foram utilizados como controles (11 pacientes). Uma porção de cada amostra de líquor foi armazenada para análise por RM, na qual 0,5 ml de LCR foram adicionados a 0,1 ml de 0,75 mM de TSP (sodium 3-trimethyl-sÍ!ylpropionate-2,2,3,3-d). Foi utilizado um espectrômetro VARIAN INOVA-500 (11,7 T), que opera a 499,886 MHz. Os espectros foram armazenados a 298 K e representaram a soma de 64 transientes adquiridos de dados 64 K...

Expressão genética de Gase, GSase e GDH em Misgurnus anguillicaudatus

Leitão, Alexandre Felipe
Fonte: Universidade de Aveiro Publicador: Universidade de Aveiro
Tipo: Dissertação de Mestrado
ENG
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Muitos peixes conseguem sobreviver a elevados níveis de amónia ambiental; entre eles está o Misgurnus anguillicaudatus, este peixe tem também a capacidade invulgar de volatilizar a amónia. Uma dos métodos de tolerar níveis elevados de amónia é através da regulação do metabolismo da glutamina. As reacções de catabólise e anabólise deste metabolismo são catalizadas pela glutaminase (Gase), glutamina sintetase (GSase) e glutamato deshidrogenase (GDH) e permitem o consumo ou síntese de amónia. Estas reacções metabólicas poderão estar à volatilização da amónia no intestino do Misgurnus anguillicaudatus. O objectivo deste trabalho consistia em caracterizar a expressão dos três genes e do seu possível envolvimento na tolerância e volatilização da amónia. A expressão genética foi analisada no decurso de duas experiências. Numa primeira vários tecidos (cérebro, guelra, rim, fígado, e três partes do intestino), de animais controlo, seriam analisados de forma a determinar uma linha base da expressão dos genes. Na segunda experiência os níveis de expressão genética, para os três genes, em duas porções do intestino (intestino anterior e posterior), de animais expostos a elevados níveis de amónia ambiental...

Estudio de las propensiones conformacionales del amino acido l-glutamato en regiones altamente estructuradas de proteínas resueltas por cristalografía de rayos x

Hincapié Parra, Dalia Andrea
Fonte: Pontifícia Universidade Javeriana Publicador: Pontifícia Universidade Javeriana
Tipo: masterThesis; Trabajo de Grado Maestría Formato: application/pdf
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Aunque el estudio de la conformación en biomoléculas es fundamental para el entendimiento de sus funciones biológicas, la información concerniente a estudios estructurales y conformacionales de las estructuras de macromoléculas a partir de los datos reportados experimentalmente resonancia magnética nuclear (RMN) y cristalografía de rayos X (DRX) y de los estados estructurales preferenciales particularmente para proteínas y los residuos de aminoácidos que las constituyen son limitados y en muchos casos inexistentes. El estudio de aminoácidos como el L-glutamato o como el de otros compuestos requiere del conocimiento de parámetros básicos como las propiedades específicas de la molécula, las cuales constituyen la fuente de información primaria. Sin embargo, la información reportada sobre los parámetros moleculares y estructurales básicos que permitan derivar información biológica para proponer modelos de correlación estadística es escasa o en muchos casos inexistente| por lo cual se hace necesario desarrollar estudios que permitan establecer relaciones entre las variaciones de las variables internas (distancias de enlace, ángulos de enlace y ángulos diedros) de las estructuras macromoleculares y las regiones altamente estructuradasque juegan un papel importante en la función de esta. De acuerdo con lo anterior el presente trabajo consistió en el análisis estructural de los glutamatos pertenecientes a las proteínas resueltas por cristalografía de rayos X y reportadas en el banco de datos de proteínas PDB hasta Septiembre de 2009 PDB. Este estudio aplicó algoritmos matemáticos para inferir estadísticamente la relación entre las variables internas derivadas de las coordenadas atómicas reportadas experimentalmente para los glutamatos y su respectiva posición en regiones altamente estructuradas de las proteínas.