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Desenvolvimento de uma prova de imunoadsorção enzimática para detecção de anticorpos contra Babesia bovis

Madruga, Cláudio R.; Araújo, Flábio R.; Marques, Ana Paula C.; Carvalho, Cristiano M.E.; Cusinato, Flávia Q.; Crocci, Adalberto J.; Kessler, Raul H.; Miguita, Midori
Fonte: Colégio Brasileiro de Patologia Animal - CBPA Publicador: Colégio Brasileiro de Patologia Animal - CBPA
Tipo: Artigo de Revista Científica Formato: 167-170
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67.3%
Uma prova de imunoadsorção enzimática (ELISA) para detecção de anticorpos contra Babesia bovis foi desenvolvida e avaliada em comparação à imunofluorescência indireta (IFI). A sensibilidade e especificidade do ELISA, determinadas pela análise de 100 soros positivos de bovinos infectados experimentalmente com B. bovis e 108 soros negativos colhidos de bovinos livres de infecção por este hemoparasito, foram de 98,0% e 98,1%, respectivamente. Os valores preditivos positivo e negativo foram, respectivamente, 98,0% e 98,1% e a precisão do teste foi de 98,1%. Não foram detectadas reações cruzadas com 80 soros de bezerros experimentalmente inoculados com Babesia bigemina. O ELISA foi comparado à IFI usando 110 soros de rebanhos de área de estabilidade endêmica e 168 soros de rebanhos de áreas de instabilidade endêmica. em ambos os casos, houve concordância significativa (P=0,631 e 0,4725, respectivamente) entre os resultados demonstrados pelos dois testes. em um estudo epidemiológico realizado com o ELISA na região do Pantanal de Mato Grosso do Sul, com 1.365 soros de bovinos, 83,9% foram positivos para anticorpos contra B. bovis, caracterizando a região estudada como endemicamente estável.; An enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) for antibodies to Babesia bovis was developed and evaluated in comparison with the indirect fluorescent antibody test (IFAT). The ELISA sensitivity and specificity...

ISOLATION OF BABESIA-BIGEMINA AND BABESIA-BOVIS MEROZOITES BY AMMONIUM-CHLORIDE LYSIS OF INFECTED ERYTHROCYTES

Machado, R. Z.; Valadao, CAA; Melo, W. R.; Alessi, A. C.
Fonte: Associação Brasileira de Divulgação Científica (ABRADIC) Publicador: Associação Brasileira de Divulgação Científica (ABRADIC)
Tipo: Artigo de Revista Científica Formato: 2591-2598
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67.06%
1. We describe the isolation of viable merozoites from erythrocytes infected with Babesia bovis or Babesia bigemina organisms by ammonium chloride lysis.2. Parasite morphology was examined by both light and transmission electron microscopy. Erythrocyte-free parasites maintain their viability and infectivity, retain their antigenicity and are suitable for use in the indirect fluorescent antibody assay.

PCR-based detection of Babesia bovis and Babesia bigemina in their natural host Boophilus microplus and cattle

Oliveira-Sequeira, T. C G; Oliveira, M. C S; Araujo, J. P.; Amarante, A. F T
Fonte: Universidade Estadual Paulista Publicador: Universidade Estadual Paulista
Tipo: Artigo de Revista Científica Formato: 105-111
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67.36%
PCR and nested-PCR methods were used to assess the frequency of Babesia bovis and Babesia bigemina infection in Boophilus microplus engorged females and eggs and in cattle reared in an area with endemic babesiosis. Blood and the engorged female ticks were from 27 naturally infested calves and 25 crossbred cows. The frequency of both Babesia species was similar in calves and cows (P > 0.05). Babesia bovis was detected in 23 (85.2%) calves and in 25 (100%) cows and B. bigemina was detected in 25 (92.6%) calves and in 21 (84%) cows. Mixed infections with the both Babesia species were identified in 42 animals, 21 in each age category. Of female ticks engorged on calves, 34.9% were negative and single species infection with B. bigemina (56.2%) was significantly more frequent (P < 0.01) than with B. bovis (4.7%). Most of the females (60.8%) engorged on cows did not show Babesia spp. infection and the frequency of single B. bovis infection (17.6%) was similar (P > 0.05) to the frequency of single B. bigemina infection (15.9%). Mixed Babesia infection was lower (P < 0.01) than single species infection in female ticks engorged either in cows (5.7%) or in calves (4.3%). An egg sample from each female was analysed for the presence of Babesia species. Of the egg samples from female ticks infected with B. bovis...

Babesia bovis infection in cattle in the southwestern Brazilian Amazon

Brito, Luciana G.; Rocha, Rodrigo B.; Barbieri, Fábio da S.; Ribeiro, Elisana S.; Vendrami, Fabiano B.; Souza, Gislaine C.R.; Giglioti, Rodrigo; Regitano, Luciana C.A.; Falcoski, Thaís O.R.S.; Tizioto, Polyana C.; Oliveira, Márcia C.S.
Fonte: Universidade Estadual Paulista Publicador: Universidade Estadual Paulista
Tipo: Artigo de Revista Científica Formato: 78-82
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67.05%
The present study provides the first epidemiological data on infection with Babesia bovis in cattle raised in the southwestern Brazilian Amazon. Blood clot samples were filtered through nylon cloth before being submitted to DNA extraction. PCR and nested-PCR were applied to assess the frequency of infection with B. bovis in calves with ages from 4 to 12 months bred in 4 microregions each in the states of Rondônia and Acre. After the DNA was extracted from the samples, the infection in cattle was investigated by amplification of the rap1 gene from B. bovis. The DNA amplification results revealed a frequency of infection with B. bovis of 95.1% (272/286) in the samples from Rondônia and 96.1% (195/203) in those from Acre. The high frequency of B. bovis infection in the animals with ages from 4 to 12 months indicates a situation of enzootic stability in the regions studied. The infection rates are comparable to those detected by immunodiagnostic techniques in other endemic regions of Brazil. © 2012 Elsevier GmbH.

Prevalência sorológica e molecular de Babesia bovis e Babesia bigemina em búfalos (Bubalus bubalis) na Ilha de Marajó, Pará

Silva, Jenevaldo B.; Lopes, Cinthia T.A.; Pinheiro, Cleyton P.; Lima, Danilo H.S.; Silva, Roberto S.L.; Fonseca, Adivaldo H.; Araújo, Flábio R.; Barbosa-Neto, José D.
Fonte: Universidade Estadual Paulista Publicador: Universidade Estadual Paulista
Tipo: Artigo de Revista Científica Formato: 847-850
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67.2%
The aim of the study was to estimate the prevalence of Babesia bovis and Babesia bigemina in water buffaloes of the Marajó Island, State of Pará, Brazil. We used an indirectenzyme- linked immunosorbent assay (iELISA), with total antigen containing proteins outer surface, and polymerase chain reaction (qPCR), involving the use of SYBR Green based on amplification of a small fragment of the cytochrome b gene. The prevalence of positive animals in iELISA to B. bovis B. bigemina and mixed infection was 24.87% (199/800), 20.75% (166/800) and 18.75% (150/800), respectively. Using the PCR, the presence of B. bovis wasdetected in 15% (18/199) and B. bigemina in 16% (19/199) of animals, and of these, 58% (11/19) presented co-infected by the two agents. The results show a low prevalence of antibodies anti-B. bovis and anti-B. bigemina in water buffaloes from Marajó Island. However, it was observed that the agents of bovine babesiosis circulate in buffaloes, and these may act as reservoirs.

Assessment of primers designed from the small ribosomal subunit RNA for specific discrimination between Babesia bigemina and Babesia bovis by PCR; Contribuição dos primers obtidos de subunidades do RNA ribossômico para discriminação entre Babesia bigemina e Babesia bovis por PCR

Linhares, Guido Fontgalland Coelho; Santana, Ângela Patrícia; Lauerman, Lloyd Herman; Madruga, Cláudio Roberto
Fonte: Universidade de Brasília Publicador: Universidade de Brasília
Tipo: Artigo de Revista Científica
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67.35%
ABSTRACT; Six pairs of species-specific primers were designed from the alignment of the sequences of the SS rRNA gene obtained from the Genbank database for Babesia bigemina (accession number X59604) and for B. bovis (accession number U06105). Three pairs of primers were designed specifically for B. bigemina and another 3 sets of primers for B. bovis. All oligonucleotide sequences selected as primers were examined for similarities to other organisms through the Genbank Blast procedure and these 6 sets of primers demonstrated high level of specificity. The synthetic oligonucleotides were also tested for specificity by PCR assay using genomic DNA extracted from 40 isolates of B. bigemina and 30 from B. bovis, obtained in six different States ofBrazil.All 6 sets of primerswere validated as 100% specific for the respective parasite. The PCR amplified the expected fragments for each set of primers, as follows: a) B. bigemina: primersGAU5forward/GAU6 reversewith amplicon of 1,124 bp; primers GAU5 forward/GAU8 reverse with amplicon of 458 bp; primersGAU7 forward/GAU6 reversewith amplicon of 685 bp; b) B. bovis: primersGAU9 forward/GAU10 reverse with amplicon of 541 bp; primers GAU9 forward/GAU 13 reverse with amplicon of 883 bp; primers SOGIN forward/ GAU10 with amplicon of 1211 bp. ______________________________________________________________________________ RESUMO; Seis pares de primers espécie-específicos foram construídos a partir do alinhamento do gene SS rRNA de Babesia bigemina (número de acesso no Genbank: X59604) e Babesia bovis (número de acesso U06105). Três pares de primers foramconstruídos especificamente para B. bigemina e outros três para B. bovis. As seqüências de oligonucleotídeos...

Impact of Babesia bovis and Babesia bigemina on the production of beef cattle in Uruguay

Solari,M. A.; Nari,A.; Cardozo,H.
Fonte: Instituto Oswaldo Cruz, Ministério da Saúde Publicador: Instituto Oswaldo Cruz, Ministério da Saúde
Tipo: Artigo de Revista Científica Formato: text/html
Publicado em 01/01/1992 EN
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67.12%
Uruguay is situated in a marginal area for the development of Boophilus microplus (30- 35- South Lat.) with important areas of enzootic instability for Babesia bovis and B. bigemina. The livestock products represent 70% of our exports, for wich reason it is fundamental to evaluate the losses in the production that these haemoparasites cause as basic information to take future decisions. In the period 1988-1990, several works were carried out by our laboratory to know the incidence of babesiosis in the reduction of liveweight gains. The results are shown and discussed in the work. Experiment I: the weight increase of the control group (x = 0,248kg/day), was 23% higher than that of the infected group with Babesia spp (from Uruguay), but significant statistical differences were not found (P < 0,05). These animals were kept in boxes and the food was controlled for 76 days. Experiment II: the incidence of Babesis spp (same strain ) was studied for 140 on Hereford heifers (n = 14) on natural pastures. The control group obtained x = 25,29kg of liveweight gain and it was 45% higher than that of the infected group, significant statistical difference were found (P < 0,05). Experiments with attenuated strains III: four studies were carried out inoculating B. bovis and B. bigemina in bovines about one year old...

Serological survey of Babesia bovis, Babesia bigemina, and Anaplasma marginale antibodies in cattle from the semi-arid region of the state of Bahia, Brazil, by enzyme-linked immunosorbent assays

Barros,Silvia L; Madruga,Claudio R; Araújo,Flabio R; Menk,Carlos F; Almeida,Maria Angela O de; Melo,Elaine PS; Kessler,Raul H
Fonte: Instituto Oswaldo Cruz, Ministério da Saúde Publicador: Instituto Oswaldo Cruz, Ministério da Saúde
Tipo: Artigo de Revista Científica Formato: text/html
Publicado em 01/10/2005 EN
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67.17%
The objectives of this work were to determine the prevalence of Babesia bovis, Babesia bigemina, and Anaplasma marginale detecting antibodies in cattle raised in the semi-arid region of the state of Bahia, Brazil, through indirect enzyme linked immunosorbent assays (ELISA) and to compare the performances of indirect enzyme-linked immunosorbent assays with crude (I-ELISA-CrAnaAg) and recombinant major surface protein-5 (I-ELISA-MSP-5Ag), as antigens to detect antibodies against A. marginale. An stable enzootic area was found in Senhor do Bonfim and Euclides da Cunha for B. bovis that showed 86 and 95.5% of prevalence, respectively, and for B. bigemina with 90.8 and 91.3%. On the other hand, Uauá and Juazeiro, were characterized as enzootically unstable areas, since prevalences were: B. bovis - 63.7 and 56.4% and B. bigemina - 53 and 54.8%, respectively. The prevalence of A. marginale in the four municipalities was above 97% with I-ELISA-CrAnaAg and 94.8% with I-ELISA-MSP-5Ag which is an indication of stable enzootic condition for the rickettsia. The I-ELISA-CrAnaAg and I-ELISA-MSP-5Ag showed a highly significant association (r = 0.977), which means that both ELISA tests are suitable for epidemiological studies of A. marginale.

Molecular and antigenic characterisation of ribosomal phosphoprotein P0 from Babesia bovis

Ramos,Carlos AN; Araújo,Flábio R; Souza,Ingrid IF; Oliveira,Renato HM; Elisei,Carina; Soares,Cleber O; Sacco,Ana MS; Rosinha,Grácia MS; Alves,Leucio C
Fonte: Instituto Oswaldo Cruz, Ministério da Saúde Publicador: Instituto Oswaldo Cruz, Ministério da Saúde
Tipo: Artigo de Revista Científica Formato: text/html
Publicado em 01/11/2009 EN
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67.11%
Babesia bovis is a tick-borne pathogen that remains an important constraint for the development of cattle industries in tropical and subtropical regions of the world. Effective control can be achieved by vaccination with live attenuated phenotypes of the parasite. However, these phenotypes have a number of drawbacks, which justifies the search for new, more efficient immunogens based mainly on recombinant protein technology. In the present paper, ribosomal phosphoprotein P0 from a Brazilian isolate of B. bovis was produced and evaluated with regard to conservation and antigenicity. The protein sequence displayed high conservation between different Brazilian isolates of B. bovis and several Apicomplexa parasites such as Theileria, Neospora and Toxoplasma. IgG from cattle experimentally and naturally infected with B. bovisas well as IgG1 and IgG2 from naturally infected cattle reacted with the recombinant protein. IgG from cattle experimentally infected with Babesia bigemina cross-reacted with B. bovis recombinant P0. These characteristics suggest that P0 is a potential antigen for recombinant vaccine preparations against bovine babesiosis.

Desenvolvimento de uma prova de imunoadsorção enzimática para detecção de anticorpos contra Babesia bovis

Madruga,Cláudio R.; Araújo,Flábio R.; Marques,Ana Paula C.; Carvalho,Cristiano M.E.; Cusinato,Flávia Q.; Crocci,Adalberto J.; Kessler,Raul H.; Miguita,Midori
Fonte: Colégio Brasileiro de Patologia Animal - CBPA; Empresa Brasileira de Pesquisa Agropecuária (EMBRAPA) Publicador: Colégio Brasileiro de Patologia Animal - CBPA; Empresa Brasileira de Pesquisa Agropecuária (EMBRAPA)
Tipo: Artigo de Revista Científica Formato: text/html
Publicado em 01/12/2000 PT
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67.08%
Uma prova de imunoadsorção enzimática (ELISA) para detecção de anticorpos contra Babesia bovis foi desenvolvida e avaliada em comparação à imunofluorescência indireta (IFI). A sensibilidade e especificidade do ELISA, determinadas pela análise de 100 soros positivos de bovinos infectados experimentalmente com B. bovis e 108 soros negativos colhidos de bovinos livres de infecção por este hemoparasito, foram de 98,0% e 98,1%, respectivamente. Os valores preditivos positivo e negativo foram, respectivamente, 98,0% e 98,1% e a precisão do teste foi de 98,1%. Não foram detectadas reações cruzadas com 80 soros de bezerros experimentalmente inoculados com Babesia bigemina. O ELISA foi comparado à IFI usando 110 soros de rebanhos de área de estabilidade endêmica e 168 soros de rebanhos de áreas de instabilidade endêmica. Em ambos os casos, houve concordância significativa (P=0,631 e 0,4725, respectivamente) entre os resultados demonstrados pelos dois testes. Em um estudo epidemiológico realizado com o ELISA na região do Pantanal de Mato Grosso do Sul, com 1.365 soros de bovinos, 83,9% foram positivos para anticorpos contra B. bovis, caracterizando a região estudada como endemicamente estável.

Risk factors associated with the frequency of antibodies against Babesia bovis and Babesia bigemina in cattle in southern Mozambique

Tembue,António A.M.; Silva,Fábio J.M.; Silva,Jenevaldo B.; Santos,Tiago M.; Santos,Huarrisson A.; Soares,Cleber O.; Fonseca,Adivaldo H.
Fonte: Colégio Brasileiro de Patologia Animal - CBPA; Empresa Brasileira de Pesquisa Agropecuária (EMBRAPA) Publicador: Colégio Brasileiro de Patologia Animal - CBPA; Empresa Brasileira de Pesquisa Agropecuária (EMBRAPA)
Tipo: Artigo de Revista Científica Formato: text/html
Publicado em 01/08/2011 EN
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67.23%
The study aimed to evaluate the risk factors associated with the frequency of IgG antibodies against Babesia bovis and B. bigemina in cattle in southern Mozambique. Eight hundred and nine serum samples were collected from cattle in three provinces namely Maputo, Gaza and Inhambane, and tested by indirect enzyme-linked immunosorbent assay (i-ELISA) to assess the humoral immune response towards B. bovis and B. bigemina. The chi-square test at 5% significance was used to determine whether there was an association between gender, age and geographic origin of seropositive animals. The overall prevalence was 78.8% (548/695) for B. bovis and 76.0% (528/695) for B. bigemina. The origin of the animals showed a significant association (p<0.05) with seropositivity to both agents, while gender and age was not associated (p>0.05). Maputo province had the highest rate of positive animals, with 93.7% (118/126) for B. bovis and 97.6% (123/126) for B. bigemina. In Gaza province 77.3% (321/415) of the animals were positive for B. bovis and 67.5% (280/415) for B. bigemina, while in the province of Inhambane the levels of seropositivity were 70.8% (109/154) and 81.2% (125/154) for B. bovis and B. bigemina respectively. In the present study, the frequency of cattle positive for B. bovis and B. bigemina was shown to increase among older age groups...

Prevalência sorológica e molecular de Babesia bovis e Babesia bigemina em búfalos (Bubalus bubalis) na Ilha de Marajó, Pará

Silva,Jenevaldo B.; Lopes,Cinthia T. A.; Pinheiro,Cleyton P.; Lima,Danilo H.S.; Silva,Roberto S. L.; Fonseca,Adivaldo H.; Araújo,Flábio R.; Barbosa-Neto,José D.
Fonte: Colégio Brasileiro de Patologia Animal - CBPA; Empresa Brasileira de Pesquisa Agropecuária (EMBRAPA) Publicador: Colégio Brasileiro de Patologia Animal - CBPA; Empresa Brasileira de Pesquisa Agropecuária (EMBRAPA)
Tipo: Artigo de Revista Científica Formato: text/html
Publicado em 01/07/2013 PT
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67.2%
O objetivo do estudo foi testar a prevalência sorológica e molecular de Babesia bovis e Babesia bigemina em búfalos da Ilha de Marajó, Pará. Foi utilizado ensaio de imunoadsorção enzimático indireto (iELISA) com antígeno total contendo proteínas de superfície externa e reação em cadeia da polimerase (qPCR), envolvendo o uso de SYBR Green com base na amplificação de um pequeno fragmento de gene do citocromo b. A prevalência de animais positivos no ELISA para B. bovis, B. bigemina e para infecção mista foi de 24.87% (199/800), 20.75% (166/800) e 18.75% (150/800), respectivamente. Na PCR foi detectado a presença de B. bovis em 15% (18/199) e de B. bigemina em 16% (19/199) dos animais, sendo que destes, 58% (11/19) apresentavam-se co-infectados pelos dois agentes. Os resultados mostram uma baixa prevalência de anticorpos anti-B. bovis e anti-B. bigemina em búfalos da Ilha do Marajó. Porém, observou-se que os agentes da babesiose bovina circulam em búfalos, podendo estes atuar como reservatórios.

PCR-based detection of babesia bovis and babesia bigemina in their natural host Boophilus microplus and cattle.

OLIVEIRA-SIQUEIRA, T. C. G.; OLIVEIRA, M. C. de S.; ARAÚJO JR., J. P.; AMARANTE, A. F. T.
Fonte: International Journal of Parasitology, v. 35, p.105-111, 2005 Publicador: International Journal of Parasitology, v. 35, p.105-111, 2005
Tipo: Artigo em periódico indexado (ALICE)
EN
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67.35%
PCR and nested-PCR methods were used to assess the frequency of Babesia bovis and Babesia bigemina infection in Boophilus microplus engorged females and eggs and in cattle reared in an area with endemic babesiosis. Blood and the engorged female ticks were from 27 naturally infested calves and 25 crossbred cows. The frequency of both Babesia species was similar in calves and cows (P>0.05). Babesia bovis was detected in 23 (85.2%) calves and in 25 (100%) cows and B. bigemina was detected in 25 (92.6%) calves and in 21 (84%) cows. Mixed infections with the both Babesia species were identified in 42 animals, 21 in each age category. Of female ticks engorged on calves, 34.9% were negative and single species infection with B. bigemina (56.2%) was significantly more frequent (P0.05) to the frequency of single B. bigemina infection (15.9%). Mixed Babesia infection was lower (P

Risk factors associated with the frequency of antibodies against Babesia bovis and Babesia bigemina in cattle in southern Mozambique.

TEMBUE, A. M.; SILVA, F. J. M.; SILVA, J. B.; SANTOS, T. M.; SANTOS, H. A.; SOARES, C. O.; FONSECA, A. H.
Fonte: Pesquisa Veterinária Brasileira, v. 31, n.8, p.663-666, Ago. 2011 Publicador: Pesquisa Veterinária Brasileira, v. 31, n.8, p.663-666, Ago. 2011
Tipo: Artigo em periódico indexado (ALICE)
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67.23%
The study aimed to evaluate the risk factors associated with the frequency of IgG antibodies against Babesia bovis and B. bigemina in cattle in southern Mozambique. Eight hundred and nine serum samples were collected from cattle in three provinces namely Maputo, Gaza and Inhambane, and tested by indirect enzyme-linked immunosorbent assay (i-ELISA) to assess the humoral immune response towards B. bovis and B. bigemina. The chi-square test at 5% significance was used to determine whether there was an association between gender, age and geographic origin of seropositive animals. The overall prevalence was 78.8% (548/695) for B. bovis and 76.0% (528/695) for B. bigemina. The origin of the animals showed a significant association (p<0.05) with seropositivity to both agents, while gender and age was not associated (p>0.05). Maputo province had the highest rate of positive animals, with 93.7% (118/126) for B. bovis and 97.6% (123/126) for B. bigemina. In Gaza province 77.3% (321/415) of the animals were positive for B. bovis and 67.5% (280/415) for B. bigemina, while in the province of Inhambane the levels of seropositivity were 70.8% (109/154) and 81.2% (125/154) for B. bovis and B. bigemina respectively. In the present study, the frequency of cattle positive for B. bovis and B. bigemina was shown to increase among older age groups...

Identificação de um polimorfismo de única base no gene rap-1 de Babesia bovis.

TIZIOTO, P. C.; OBREGON, D.; REGITANO, L. C. de A.; IBELLI, A. M. G.; GIGLIOTI, R.; NORDI, E. C. P.; OLIVEIRA, M. C. de S.
Fonte: In: CONGRESSO BRASILEIRO DE PARASITOLOGIA VETERINÁRIA, 16., Campo Grande. Anais... Campo Grqande: CBPV, 2010. Publicador: In: CONGRESSO BRASILEIRO DE PARASITOLOGIA VETERINÁRIA, 16., Campo Grande. Anais... Campo Grqande: CBPV, 2010.
Tipo: Resumo em anais de congresso (ALICE)
PT_BR
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67.19%
Babesia bovis provoca um grave quadro de anemia hemolítica em bovinos, resultando em grandes prejuízos devido à mortalidade, abortos, redução de fertilidade e queda da produção de carne e leite. O gene RAP-1 (Rhoptry-associated protein)1 de Babesia bovis codifica uma proteína de 60 KDa, que é reconhecida por anticorpos e linfócitos T de bovinos. O objetivo deste trabalho foi verificar a presença de polimorfismos no gene RAP-1 de Babesia bovis amplificado de material proveniente de búfalos infectados. Parte do gene RAP-1 de B. bovis foi amplificado por Nested-PCR. Foram sequenciadas amostras de quatro búfalos e de um bovino para que se pudesse comparar as sequências obtidas nestas espécies. As reações de seqüenciamento foram realizadas utilizando o Kit ABI PRISM® Big Dye terminator v. 3.1 cycle sequencing da Applied Biosystem. Os eletroferogramas gerados pelo seqüenciador ABI 3100 foram submetidos à análise de qualidade pelo programa Phred, que atribui um valor de qualidade a cada nucleotídeo identificado. Em seguida, foram submetidos ao programa de montagem Phrap que agrupa as sequências organizando-as em contigs. A visualização das sequências geradas e, conseqüentemente, dos SNPs foi realizada através do programa Consed. Não foi encontrada diferença entre a sequência de B. bovis isolada de bovino e as dos isolados de búfalos...

Avaliação e otimização de Reações da Polimerase em Cadeia para diagnóstico molecular e estudo epidemiológico de Babesia bovis

Pereira, Danielle Andrade Almeida
Fonte: Universidade Federal de Mato Grosso do Sul Publicador: Universidade Federal de Mato Grosso do Sul
Tipo: Dissertação de Mestrado
POR
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67.08%
Babesia bovis é um hemoprotozoário que causa doença caracterizada por febre, fraqueza, ataxia, hemoglobinúria e anemia, provocando assim, grandes perdas econômicas na bovinocultura. Com a finalidade de um diagnóstico preciso e eficaz, a reação da polimerase em cadeia com os primers GAU3-5´-CTGGTTGATCCTGCCAGTAG-3´ e GAU10-5´-GCACGGACGGAGACCGA-3´ (PCR-S) (Linhares et al. 2002) e semi-nested SNPCR que utilizou o primer forward GAU9-5´-CTGTCGTACCGTTGGTTGAC-3´ e o reverse GAU10 baseados no gene SSrRNA, foram avaliadas juntamente com a PCR-Ves3 que utilizou primers Ves3F–5´-TGCCTCTGGGTTACGGGATGAAGT-3’ e Ves3R-5’-CAGGGGAGCCGTATGTCGTATTG-3’ da seqüência do gene ves1α de Babesia bovis. Na determinação da prevalência de animais de duas regiões de estabilidade enzoótica (CO e S) a PCR-Gau3/10, SNPCR-Gau9/10 e PCR-Ves3 apresentaram 78% , 91% e 50,6% de positivos respectivamente, além de estatisticamente apresentarem diferenças significativas entre elas, e no modelo experimental, a SNPCR-Gau9/10 confirmou elevada sensibilidade (59%). Todos os animais avaliados aos sete dias de idade foram positivos na SNPCR-Gau9/10, sugerindo que há uma elevada taxa de infecção nos primeiros dias de vida e que possivelmente também ocorra transmissão vertical da B. bovis no sistema de criação do rebanho estudado. Portanto...

Avalia????o de um ELISA competitivo para detec????o de anticorpos contra Babesia bovis; Evaluation of diagnostic tests for Babesia bovis

G??TZE, Marcelo Mendes
Fonte: Universidade Federal de Pelotas; Biotecnologia; Programa de P??s-Gradua????o em Biotecnologia; UFPel; BR Publicador: Universidade Federal de Pelotas; Biotecnologia; Programa de P??s-Gradua????o em Biotecnologia; UFPel; BR
Tipo: Dissertação Formato: application/pdf
POR
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67.34%
Bovine babesiosis caused by Babesia bovis and Babesia bigemina, is the most important disease transmitted by Rhipicephalus (Boophilus) microplus in tropical and subtropical areas in South America. Definitive diagnosis can be made by detecting infected erythrocytes in blood smears. However, the parasitemia in peripheral blood is often too low for this method to be used for diagnostic purposes. For this reason, several serological tests, including complement fixation, indirect hemagglutination and indirect immunofluorescence (IIF) have been used to detect antibodies in infected cattle. Although these tests allow the detection of persistently infected animals, they have limitations in specificity and/or sensitivity. The IIF has been the most sensitive, but cross-reactivity between species, subjective interpretation, and low production has limited its usefulness. The enzyme linked immunosorbent assay (ELISA) have found wide application in the diagnosis of infectious diseases. The cELISA format (competitive) can provide an additional level of specificity, because the antibody is directed to a single epitope, specific for the organism to be detected. For these reasons, this study aimed to evaluate the sensitivity and specificity of cELISA compared to IIF and nested PCR (nPCR) for diagnosis babesiosis caused by B. bovis. Therefore...

Condição imunológica de bovinos das raças Holandesa e Nelore frente a Babesia bovis e B. bigemina em duas regiões do Estado de São Paulo

D'Andrea, LAZ; Sartor, I. F.; Madruga, C. R.; Freitas, SBZ; Kroll, L. B.; Kronka, S. N.
Fonte: Revista Pesquisa Veterinaria Brasileira Publicador: Revista Pesquisa Veterinaria Brasileira
Tipo: Artigo de Revista Científica Formato: 74-78
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The immunological reply of a population to an infectious agent can vary between races and handling of this population. Regional research becomes important, in order to know the interrelation between the agent and its host. In this way, the occurrence of immunoglobulins of class G, anti-Babesia bovis and anti-Babesia bigemina in the Nelore (Bos indicus) and Hostein breed (Bos taurus), was investigated in two regions of the State of São Paulo, 300 km distant from each other. For the indirect method of ELISA, 1, 161 bovine serum samples were tested. The medium frequencies of antibodies showed that in the two regions exists an enzootic stability for B. bovis in both breeds studied; even so there was a tendency of marginal area for the Nelore breed in one of the regions. Regarding B. bigemina, in both regions exists enzootic stability for the Hostein and enzootic instability for the Nelore breed. Therefore, acute cases of the disease or specific outbreaks by B. bigemina infection in the Nelore breed may occur in these regions.

Preval?ncia sorol?gica e molecular de Babesia bovis e Babesia bigemina em b?falos (Bubalus bubalis) na Ilha de Maraj?, Par?

SILVA, Jenevaldo Barbosa da; LOPES, Cinthia T?vora de Albuquerque; PINHEIRO, Cleyton Prado; LIMA, Danillo Henrique da Silva; SILVA, Roberto S. L.; FONSECA, Adivaldo Henrique da; ARA?JO, Fl?bio Ribeiro de; BARBOSA NETO, Jos? Diomedes
Fonte: Universidade Federal do Pará Publicador: Universidade Federal do Pará
Tipo: Artigo de Revista Científica
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O objetivo do estudo foi testar a preval?ncia sorol?gica e molecular de Babesia bovis e Babesia bigemina em b?falos da Ilha de Maraj?, Par?. Foi utilizado ensaio de imunoadsor??o enzim?tico indireto (iELISA) com ant?geno total contendo prote?nas de superf?cie externa e rea??o em cadeia da polimerase (qPCR), envolvendo o uso de SYBR Green com base na amplifica??o de um pequeno fragmento de gene do citocromo b. A preval?ncia de animais positivos no ELISA para B. bovis, B. bigemina e para infec??o mista foi de 24.87% (199/800), 20.75% (166/800) e 18.75% (150/800), respectivamente. Na PCR foi detectado a presen?a de B. bovis em 15% (18/199) e de B. bigemina em 16% (19/199) dos animais, sendo que destes, 58% (11/19) apresentavam-se co-infectados pelos dois agentes. Os resultados mostram uma baixa preval?ncia de anticorpos anti-B. bovis e anti-B. bigemina em b?falos da Ilha do Maraj?. Por?m, observou-se que os agentes da babesiose bovina circulam em b?falos, podendo estes atuar como reservat?rios.; ABSTRACT: The aim of the study was to estimate the prevalence of Babesia bovis and Babesia bigemina in water buffaloes of the Maraj? Island, State of Par?, Brazil. We used an indirect enzyme-linked immunosorbent assay (iELISA), with total antigen containing proteins outer surface...

Transmisión de cepas atenuadas de Babesia bigemina y Babesia bovis por garrapatas Rhipicephalus (Boophilus) microplus

Rojas Ramírez,Edmundo Enrique; Mosqueda Gualito,Juan Joel; Álvarez Martínez,Jesús Antonio; Hernández Ortíz,Rubén; Ramos Aragón,Juan Alberto; Rojas Martínez,Carmen; Cantó Alarcón,Germinal J.; Vega y Murguía,Carlos Agustín; Figueroa Millán,Jul
Fonte: Instituto Nacional de Investigaciones Forestales, Agrícolas y Pecuarias Publicador: Instituto Nacional de Investigaciones Forestales, Agrícolas y Pecuarias
Tipo: Artigo de Revista Científica Formato: text/html
Publicado em 01/09/2011 ES
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Para evaluar la transmisión por garrapatas Rhipicephalus microplus (R. microplus) de una clona atenuada de Babesia bovis (BOR) y una cepa atenuada de Babesia bigemina (BIS), doce bovinos se dividieron en cuatro grupos e infestados de forma escalonada con larvas de R. microplus libres de Babesia spp. Un becerro de cada grupo se inoculó con 1x10(8) eritrocitos infectados (EI) con BIS, BOR, y cepas virulentas de B. bigemina y B. bovis, respectivamente. Se realizaron dos inoculaciones seriadas adicionales (pases/jeringa) y se colectaron hembras R. microplus cuya repleción coincidió con presencia de EI en los bovinos inoculados, y cuya progenie fue utilizada para infestar un grupo de bovinos receptores (pases/garrapata). Los tres pases sucesivos por jeringa evidenciaron EI en los bovinos que recibieron las cepas atenuadas y virulentas de B. bigemina y B. bovis. Se identificaron quinetos de Babesia en garrapatas alimentadas sobre bovinos infectados con cepas virulentas de B. bigemina y B. bovis. No se identificaron quinetos en garrapatas alimentadas sobre bovinos inoculados con cepas atenuadas. Todos los receptores infestados con progenie de garrapatas alimentadas sobre bovinos infectados con cepas virulentas, resultaron positivos a Babesia. Contrariamente...